[发明专利]高效筛选水稻愈伤组织培养基的方法在审
| 申请号： | 201711498837.3 | 申请日： | 2017-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN108148799A | 公开（公告）日： | 2018-06-12 |
| 发明（设计）人： | 刘佳音;张国栋;刘鹏飞;修旺珊;葛旭娟;米铁柱 | 申请（专利权）人： | 青岛袁策生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/02 | 分类号： | C12N5/02;A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京华仁联合知识产权代理有限公司 11588 | 代理人： | 李冰 |
| 地址： | 266000 山东省*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 无菌水漂洗 水稻愈伤组织 愈伤组织诱导 高效筛选 培养基 消毒 愈伤组织诱导培养基 诱导愈伤组织 培养基配方 生根培养基 次氯酸钠 酒精处理 清水冲洗 水稻材料 水稻种子 无菌滤纸 愈伤诱导 愈伤组织 成苗率 成熟胚 芽分化 成苗 出芽 继代 省力 省时 吸干 愈伤 接种 筛选 分化 进度 申请 统计 帮助 研究 | ||
1.一种高效筛选水稻愈伤组织培养基的方法，其特征在于，包括以下步骤：
①愈伤组织诱导；
②愈伤组织继代；
③诱导愈伤组织芽分化之后，再将分化出芽的愈伤置于生根培养基上培养成苗，最后统计出愈率和成苗率。
2.根据权利要求1所述高效筛选水稻愈伤组织培养基的方法，其特征在于，所述步骤①愈伤组织诱导，进一步包括：成熟胚消毒：
水稻种子清水冲洗干净，无菌水漂洗3-5次；
用75％酒精处理3-5min，无菌水漂洗3-5次；
再以5-10％的次氯酸钠消毒15-20min，无菌水漂洗4-5次；
无菌滤纸吸干种子，接种至愈伤组织诱导培养基。
3.根据权利要求1所述高效筛选水稻愈伤组织培养基的方法，其特征在于，所述愈伤组织诱导包含培养基配方为：MS基本培养基+激素组合+额外添加物+蔗糖+植物凝胶。
4.根据权利要求3所述高效筛选水稻愈伤组织培养基的方法，其特征在于，所述激素组合为2，4-D 1.5-2.5mg/L，6-BA 0-0.5mg/L，KT 0-0.5mg/L。
5.根据权利要求1所述高效筛选水稻愈伤组织培养基的方法，其特征在于，所述①愈伤组织诱导，进一步包括：将消毒后的成熟胚接种于培养基中，于26-28℃下16h光照8h黑暗，光强1000-20001ex培养，待愈伤长出后，将长势最好的胚性愈伤转移至继代培养基培养。
6.根据权利要求1所述高效筛选水稻愈伤组织培养基的方法，其特征在于，所述②愈伤组织继代包含培养基配方为：MS基本培养基+激素组合+额外添加物+蔗糖+植物凝胶。
7.根据权利要求6所述高效筛选水稻愈伤组织培养基的方法，其特征在于，所述激素组合为2，4-D 1.0-2.0mg/L，6-BA 0-0.5mg/L，KT 0-0.5mg/L。
8.根据权利要求1所述高效筛选水稻愈伤组织培养基的方法，其特征在于，所述②愈伤组织继代，进一步包括：将长势最好的胚性愈伤转移至继代培养基上，于26-28℃下16h光照8h黑暗，光强1000-20001ex培养，持续培养5-10天。
9.根据权利要求1所述高效筛选水稻愈伤组织培养基的方法，其特征在于，所述诱导愈伤组织芽分化包含培养基配方为：MS基本培养基+激素组合+额外添加物+蔗糖+植物凝胶。
10.根据权利要求9所述高效筛选水稻愈伤组织培养基的方法，其特征在于，所述激素组合为6-BA 1.0-2.0mg/L，NAA 0-0.5mg/L，KT 1.0-2.0mg/L。
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