[发明专利]一种诱导猪肠道自噬模型的构建方法

权利要求书

1.一种诱导猪肠道自噬模型的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：

对试验仔猪进行自噬诱导处理，得到待测仔猪；

从待测仔猪的前腔静脉采血并分离血浆，测定血浆中的生化指标；

取待测仔猪的肠黏膜样品，观察肠黏膜样品的形态结构，并测定肠黏膜相关蛋白表达。

2.如权利要求1所述的诱导猪肠道自噬模型的构建方法，其特征在于，所述对试验仔猪进行自噬诱导处理，得到待测仔猪的步骤，具体包括：

对试验仔猪喂含诱导剂的饲料，得到待测仔猪。

3.如权利要求2所述的诱导猪肠道自噬模型的构建方法，其特征在于，所述诱导剂为含有β－伴大豆球蛋白的饲料。

4.如权利要求3所述的诱导猪肠道自噬模型的构建方法，其特征在于，所述β－伴大豆球蛋白的饲喂量为仔猪的每公斤体重饲喂2.5g，诱导时长为2天。

5.如权利要求3所述的诱导猪肠道自噬模型的构建方法，其特征在于，所述含有β－伴大豆球蛋白的饲料为含有β－伴大豆球蛋白的奶水，每顿饲喂的奶水中含有20g奶粉。

6.如权利要求1所述的诱导猪肠道自噬模型的构建方法，其特征在于，所述对试验仔猪进行自噬诱导处理，得到待测仔猪的步骤之前，还包括：

对试验仔猪喂奶水饲养6天。

7.如权利要求6所述的诱导猪肠道自噬模型的构建方法，其特征在于，所述对试验仔猪喂奶水饲养6天的步骤，具体包括如下步骤：

在第一天每顿饲喂含15g奶粉的奶水；

在第二天每顿饲喂含18g奶粉的奶水；

在第三天至第六天每顿饲喂含18g奶粉的奶水；

其中，每天饲喂五顿。

8.如权利要求6所述的诱导猪肠道自噬模型的构建方法，其特征在于，每顿喂的所述奶水中添加有2－3片土霉素。

9.如权利要求1所述的诱导猪肠道自噬模型的构建方法，其特征在于，所述取待测仔猪的肠黏膜样品的步骤中，具体包括：

对采血后的待测仔猪的腹腔注射戊巴比妥钠，使待测仔猪完全麻醉后屠宰并取出空肠中段，并分成第一段和第二段；

将第一段用pH值为7.4的4℃生理盐水溶液冲洗并剪开，刮下肠黏膜，用于测定肠黏膜自噬相关蛋白表达；

将第二段用pH值为7.4的4℃生理盐水溶液冲洗并置于浓度为10％的福尔马林溶液中固定后，经过脱水与包埋、切片并进行HE染色，用于观察肠道组织形态。

10.如权利要求1所述的诱导猪肠道自噬模型的构建方法，其特征在于，所述从待测仔猪的前腔静脉采血并分离血浆的步骤，具体包括：

从待测仔猪的前腔静脉采血并置于抗凝管内，在4℃下以3000rpm的转速离心10min，分离出血浆并置于－80℃的环境待测。