[发明专利]裂殖壶菌及其产淀粉酶的应用有效
申请号: | 201711493963.X | 申请日: | 2017-12-31 |
公开(公告)号: | CN108220171B | 公开(公告)日: | 2020-06-09 |
发明(设计)人: | 于欣君;汪钊;陈虹 | 申请(专利权)人: | 浙江工业大学 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12N9/26;C12R1/645 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 黄美娟;李世玉 |
地址: | 310014 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 裂殖壶菌 及其 淀粉酶 应用 | ||
1.裂殖壶菌(Aurantiochytrium sp.)WZYU003,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号:CCTCC NO:M 2016618,保藏日期为:2016年11月7日,保藏地址为中国武汉,武汉大学,邮编430072。
2.一种利用权利要求1所述裂殖壶菌WZYU003生产淀粉酶的方法,其特征在于所述方法为:将裂殖壶菌WZYU003接种至发酵培养基中,在20-35℃下,50-600rpm振荡培养,得到发酵液,将发酵液离心,弃细胞沉淀,得到含淀粉酶的粗酶液,将粗酶液分离纯化,获得淀粉酶;所述发酵培养基组成为:葡萄糖20-120g/L,酵母粉10-60g/L,蛋白胨0-20g/L,海盐20g/L,溶剂为水,pH值自然。
3.如权利要求2所述利用裂殖壶菌WZYU003生产淀粉酶的方法,其特征在于所述裂殖壶菌WZYU003接种前先进行平板活化和种子扩大培养:(1)平板活化:将裂殖壶菌WZYU003接种于平板培养基,30℃下培养2-3天,获得平板菌体;所述平板培养基组成为:葡萄糖20g/L,酵母粉10g/L,蛋白胨5g/L,海盐20g/L,琼脂20g/L,溶剂为水,pH值自然;(2)种子培养:将平板菌体接入含100mL种子培养基的500mL三角瓶中,在30℃下,200rpm震荡培养1-2天,得到种子液;所述种子培养基组成为:葡萄糖60g/L,酵母粉10g/L,蛋白胨5g/L,海盐20g/L,溶剂为水,pH值自然。
4.如权利要求3所述利用裂殖壶菌WZYU003生产淀粉酶的方法,其特征在于所述发酵液按如下方法制备:将种子液接入含发酵培养基的发酵罐中,在20-35℃下,转速50-600rpm,通气量20-100L/min,溶氧量10-60%的条件下,培养时间1-6天,获得发酵液。
5.如权利要求3所述利用裂殖壶菌WZYU003生产淀粉酶的方法,其特征在于所述种子液以体积浓度的1%-20%的接种量接种至发酵培养基。
6.如权利要求4所述利用裂殖壶菌WZYU003生产淀粉酶的方法,其特征在于发酵培养条件为:温度25-32℃,转速100-400rpm,通气量20-80L/min,溶氧量20-50%,培养时间3-5天。
7.如权利要求2所述利用裂殖壶菌WZYU003生产淀粉酶的方法,其特征在于所述发酵液离心条件为:5000rpm,4℃下离心5min。
8.如权利要求2所述利用裂殖壶菌WZYU003生产淀粉酶的方法,其特征在于所述发酵培养基组成为:葡萄糖100g/L,酵母粉20g/L,蛋白胨5g/L,海盐20g/L,溶剂为水,pH值自然。
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