[发明专利]一种猪肉功能性多肽及其制备方法

说明书

本发明公开了猪肉功能性多肽的制备方法，包括猪肉的预处理，猪肉的酶解以及多肽的制备。本发明也公开了该方法所制备的猪肉功能性多肽。有益效果为：本发明制备方法快速简单，且底物中所含的抑制剂与酶的结合程度小，酶解反应速率快，大大缩短了酶解的时间，同时酶解反应充分，使猪肉资源得到了充分利用；所制备的多肽能够清除自由基、抑制脂质过氧化和保护细胞免受氧化损伤。

技术领域

本发明涉及到生物活性肽领域，尤其是涉及一种猪肉功能性多肽及其制备方法。

背景技术

生物活性肽是氨基酸以不同排列方式和组合构成的包括二肽和复杂的环形、线形结构的不同肽类的总称。不同的生物肽具有不同的结构和生理功能，如抗病毒、抗癌、抗血栓、抗高血压、免疫调节、激素调节、抑菌、降胆固醇等作用。猪肉是日常生活的主要副食品，具有补虚强身，滋阴润燥、丰肌泽肤的作用。现阶段，对于猪肉多肽的研究较少。

发明内容

本发明的目的在于提供猪肉功能性多肽的制备方法，该多肽制备效率高，酶解时间少，且酶解充分，使猪肉资源得到了充分利用。

本发明的另一目的在于提供一种猪肉功能性多肽，该多肽能够清除自由基、抑制脂质过氧化和保护细胞免受氧化损伤。

本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：猪肉功能性多肽的制备方法，该多肽的制备方法包括以下步骤：

猪肉预处理：将新鲜宰杀猪肉在温度-25～-30℃下冷冻25～30h，该冷冻步骤能够延长猪肉的保质期，为酶解过程提供了高品质的原料；

猪肉的酶解：取冷冻猪肉解冻，向解冻的猪肉中加入蒸馏水，料液比为1g:3～7mL，调pH为6.5～7.5，加入猪肉质量1.0%～1.5%的木瓜蛋白酶，在50～55℃酶解4～6h，加热到90℃灭酶活10min，调pH为9～10，加入猪肉质量0.8%～1.2%的碱性蛋白酶，在42～50℃酶解3～6h，加热到90℃灭酶活10min，冷却至常温，10000r/min离心15min，收集上清液，得猪肉酶解液，该条件下，底物中所含的抑制剂与酶的结合程度小，酶解反应速率快，大大缩短了酶解的时间，同时酶解反应充分，使猪肉资源得到了充分利用；

多肽的制备：将猪肉酶解液经截留分子量为1kDa的超滤膜进行过滤，收集截留液，将截留液按照体积比加入到装有8～10倍D101大孔树脂的层析柱中，用3～5倍柱体积水洗脱除去杂质，然后用5～8倍柱体积的质量分数为60%～62%乙醇水溶液进行洗脱，乙醇洗脱液在50℃旋蒸除去乙醇、冷冻干燥得多肽。该过程操作简单，重复性好，且洗脱范围广，可根据实际情况进行放大条件实现工业化生产。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：本发明通过猪肉的预处理、酶解等步骤制得猪肉功能性多肽，制备方法简单快速，且底物中所含的抑制剂与酶的结合程度小，酶解反应速率快，大大缩短了酶解的时间，同时酶解反应充分，使猪肉资源得到了充分利用；所制备的多肽能够清除自由基、抑制脂质过氧化和保护细胞免受氧化损伤。

具体实施方式

以下结合实施例作进一步详细描述：

实施例1：猪肉功能性多肽的制备方法，包括以下步骤：

1)猪肉预处理：将新鲜宰杀猪肉在温度-25℃下冷冻25h，该冷冻步骤能够延长猪肉的保质期，为酶解过程提供了高品质的原料；

2)猪肉的酶解：取冷冻猪肉解冻，向解冻的猪肉中加入蒸馏水，料液比为1g:3mL，调pH为6.5，加入猪肉质量1.0%的木瓜蛋白酶，在50℃酶解4h，加热到90℃灭酶活10min，调pH为9，加入猪肉质量0.8%的碱性蛋白酶，在42℃酶解3h，加热到90℃灭酶活10min，冷却至常温，10000r/min离心15min，收集上清液，得猪肉酶解液，该条件下，底物中所含的抑制剂与酶的结合程度小，酶解反应速率快，大大缩短了酶解的时间，同时酶解反应充分，使猪肉资源得到了充分利用；