[发明专利]一种直接识别3-氨基-5-吗啉甲基-2-恶唑烷酮的单链抗体及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201711482207.7 | 申请日： | 2017-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN108218992B | 公开（公告）日： | 2021-07-09 |
| 发明（设计）人： | 徐振林;陈子键;王弘;沈玉栋;肖治理;雷红涛;杨金易;孙远明 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | C07K16/44 | 分类号： | C07K16/44;C12N15/70;G01N33/58 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 任重 |
| 地址： | 510642 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 直接 识别 氨基 甲基 恶唑烷酮 抗体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种直接识别3-氨基-5-吗啉甲基-2-恶唑烷酮的单链抗体，其特征在于，包括重链可变区和轻链可变区；所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.根据权利要求1所述的单链抗体，其特征在于，所述单链抗体的氨基酸序列如SEQ IDNO.5所示。
3.一种编码权利要求1所述单链抗体的核酸，其特征在于，所述核酸的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。
4.权利要求1所述单链抗体在检测3-氨基-5-吗啉甲基-2-恶唑烷酮中的应用。
5.权利要求1所述单链抗体在制备检测3-氨基-5-吗啉甲基-2-恶唑烷酮的试剂盒方面的应用。
6.根据权利要求4或5所述的应用，其特征在于，所述检测的方法是酶联免疫分析法。
7.权利要求1所述直接识别3-氨基-5-吗啉甲基-2-恶唑烷酮的单链抗体的制备方法，其特征在于，是将SEQ ID NO.3所示序列和SEQ ID NO.4所示序列鉴定之后，通过连接肽核苷酸序列相连接，并连接到载体质粒，构建重组质粒，重组质粒鉴定之后，转化受体菌株，筛选阳性重组受体菌株，经表达优化后，获得直接识别AMOZ单链抗体；其中，单链抗体可溶性蛋白提取采用Tris-蔗糖法提取大肠杆菌周质腔中可溶性单链抗体蛋白。
8.一种3-氨基-5-吗啉甲基-2-恶唑烷酮的酶联免疫检测方法，其特征在于，以权利要求1或2所述单链抗体进行ci-ELISA检测。
9.一种3-氨基-5-吗啉甲基-2-恶唑烷酮的酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，包含有：权利要求1或2所述单链抗体、包被液、包被原、酶标板、洗涤液、封闭液、HRP-抗his鼠单克隆抗体、HRP-羊抗鼠、TMB底物液、底物缓冲液、终止液。
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