[发明专利]鱿鱼墨多糖的提取方法

说明书

本发明公开了鱿鱼墨多糖的提取方法，其具体步骤为：将鱿鱼墨热水浸提后冷水浸提，离心获得的上清液过超滤膜，即得鱿鱼墨粗多糖提取液；将鱿鱼墨粗多糖提取液中加入木瓜蛋白酶和脂肪酶进行酶解，酶解上清液中加入正丁醇、氯仿和三乙醇胺的混合溶液剧烈搅拌，离心，浓缩后醇沉得鱿鱼墨粗多糖；将鱿鱼墨粗多糖上已活化固相萃取柱，浓缩收集液，然后将浓缩收集液上纤维素离子交换柱，浓缩收集液，透析，冷冻干燥，即得鱿鱼墨多糖。有益效果为：本发明提取方法简单可行，资源利用率高，提取速率快，提取率高，杂蛋白和色素除去率高，多糖纯度高，不影响多糖活性。

技术领域

本发明涉及鱼类产品深加工技术领域，特别涉及鱿鱼墨多糖的提取方法。

背景技术

鱿鱼，虽然习惯上称它们为鱼，其实它并不是鱼，而是生活在海洋中的软体动物。鱿鱼属于软体动物门，头足纲，枪乌贼科，通称枪乌贼。体色苍白，体圆锥形，头大，有淡褐色斑，前方生有10条触足，常成群游弋于深约20米的海洋中。常活动于浅海中上层，垂直移动范围达百余米。肉质细嫩，风味类似于鲍鱼，但价格很低，被成为“穷人的鲍鱼”。西方人因为鱿鱼表皮暗且易变，而称鱿鱼为“魔鬼鱼”；西班牙人吃鱿鱼比较多，他们把鱿鱼加工成不同风味的罐头，鱿鱼酱油，鱿鱼圈等；美国人近几年来也开始提倡吃鱿鱼，他们把鱿鱼加工成类似鲍鱼的形态出售；鱿鱼在日本很受欢迎，已成为日本日常生活中必不可少的水产品，日本人把鱿鱼一般加工成冷冻制品、干制品、珍味制品、盐渍制品、加热杀菌制品。鱿鱼加工中产生的副产物，如皮、内脏、眼及墨囊等，都作为废弃物丢掉，不仅造成了环境污染，也不能提高鱿鱼加工的附加值。鱿鱼全身都是宝，鱿鱼皮中含有大量的胶原蛋白，可用来提取胶原蛋白；内脏中含有促进草虾摄饵的氨基酸，粗脂肪（不饱和脂肪酸的含量很高），蛋白质（可用来生产鱿鱼酱油）；墨囊中的墨汁已被证实具有抗菌功能，还有抗肿瘤和增强免疫的功能。鱿鱼的墨汁约占鱿鱼体重的1.28%，是由肉眼看不见的黑色颗粒构成的黏稠的混悬液，其主要化学成分为黑色素和蛋白多糖复合体，但我国对鱿鱼中所含的墨囊或汁的利用未加重视。鱿鱼墨多糖能显著提高免疫低下小鼠的脾脏体重比值、提高血清溶血素含量、增强迟发型变态反应能力、提高腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力和碳廓清能力，进而能提高免疫低下小鼠的体液免疫、细胞免疫和非特异性免疫功能。

现有技术如授权公告号为CN 100467061 C的中国发明专利，公开了一种鱿鱼墨汁多糖的制备方法，步骤如下：按下述重量比：活体冷冻经人工分拣的鱿鱼墨汁1至99.985份、2000u/g食品级脂肪酶0.1至0.005份、100万u/g食品级木瓜蛋白酶0.1至0.001份，对墨汁采用脂肪酶和木瓜蛋白酶在温和条件下进行复合酶水解，滤液中加入95%食用乙醇或化学纯丙酮，使墨汁多糖沉淀，沉淀用去离子水溶解后，回收乙醇或丙酮，干燥后的沉淀用不锈钢粉碎机粉碎即成品鱿鱼墨汁多糖。该制备方法克服了多糖物质具有热不稳性和较小的酸碱稳定性，高温或pH>7或pH<5都会引起多糖的氧化和降解的难题。该方法的分离和提取都是非常简便的，利用鱿鱼墨囊为原料，分离并提取得到符合医药原料要求的鱿鱼墨汁多糖，但是该制备方法多糖的提取率低，水提取多糖的残渣中残留的多糖未提取，造成资源浪费，且得到的多糖中杂蛋白和色素含量较高。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提取方法简单可行，资源利用率高，提取速率快，提取率高，杂蛋白和色素除去率高，多糖纯度高，不影响多糖活性的鱿鱼墨多糖的提取方法。

本发明针对上述技术中提到的问题，采取的技术方案为：

鱿鱼墨多糖的提取方法，包括鱿鱼墨粗多糖提取液制备、初步纯化、固相萃取柱层析、离子交换柱层析，其具体步骤为：