[发明专利]一种幼苗长势好的铁皮石斛的组织养方法

说明书

本发明公开了一种幼苗长势好的铁皮石斛的组织养方法，取成年态铁皮石斛茎段，用流水冲洗干净后，用0.1%的升汞溶液浸泡3‑9分钟，用无菌水冲洗4‑5次，置超净工作台上，切成长度为1‑2cm、带2‑3个节的小茎段，再用0.1%的升汞溶液浸泡1‑3分钟，用无菌水冲洗4‑5次后，接种于无菌诱导培养基中，在温度24‑26℃、日光灯照射24小时/天、光照强度800‑1200lx下培养40天后，茎段在节间处长出幼苗，待幼苗长至1‑2cm后，转接到生根培养基中生根，在光照为2000‑3000Lx，温度为20‑25℃培养50‑60天，即得。本发明方法对铁皮石斛进行组织培养时，生根率高，幼苗长势好。

技术领域

本发明涉及一种铁皮石斛的组织培养方法，特别是一种幼苗长势好的铁皮石斛的组织养方法。

背景技术

铁皮石斛别称铁皮兰、吊兰、云南铁皮、铁皮吊兰，是兰科石斛属多年生草本植物，铁皮石斛是石斛类药材的上品，素有“中华仙草-药中黄金”之美称，以茎入药，含有多糖、石斛碱、生物碱等有效成分，具有滋阴清热、生津益胃、润喉明目等功效，在抗肿瘤、提高人体免疫力、治疗胃肠道疾病、抗衰老、抗氧化、抗血小板聚集、降低血糖、治疗白内障等方面均有良好疗效。

现代药理学研究表明，铁皮石斛对非特异性及特异性免疫均有增强作用，在抗肿瘤、抗氧化、降低血糖以及白内障的治疗等方面，药理作用显著。其化学成分较复杂，已确定的化合物类型主要有：生物碱类、多糖类、菲类、联苄母核类，其中生物碱类、多糖类药理活性较为显著。石斛碱型倍半萜类生物碱为石斛属植物特有，其中石斛碱是最早发现，研究最多的生物碱；金钗石斛碱与非甾体类抗炎药药理作用相似，具有免疫调节、抗炎、扩张血管等作用。

目前，利用组培技术对铁皮石斛在种质保存和快速繁殖方面已取得一定成就，但优良品种经数次继代或因激素使用不当、培养环境等因素，导致幼苗长势不好，生根率极低。

发明内容

本发明的目的，是提供一种幼苗长势好的铁皮石斛的组织养方法，本发明方法对铁皮石斛进行组织培养时，生根率高，幼苗长势好。

本发明是这样实现的：一种幼苗长势好的铁皮石斛的组织养方法，取成年态铁皮石斛茎段，用流水冲洗干净后，用0.1％的升汞溶液浸泡3-9分钟，用无菌水冲洗4-5次，置超净工作台上，切成长度为1-2cm、带2-3个节的小茎段，再用0.1％的升汞溶液浸泡1-3分钟，用无菌水冲洗4-5次后，接种于无菌诱导培养基中，在温度24-26℃、日光灯照射24小时/天、光照强度800-1200lx下培养40天后，茎段在节间处长出幼苗，待幼苗长至1-2cm后，转接到生根培养基中生根，在光照为2000-3000Lx，温度为20-25℃培养50-60天，即得。

前述的幼苗长势好的铁皮石斛的组织养方法中，所述的诱导培养基为：向 1LMS培养基中加入NAA2.0-4.0mg、土豆泥5-10g和蔗糖15-25g，混匀，即得。

前述的幼苗长势好的铁皮石斛的组织养方法中，所述的诱导培养基为：向 1LMS培养基中加入NAA 3.0mg、土豆泥7g和蔗糖20g，混匀，即得。

前述的幼苗长势好的铁皮石斛的组织养方法中，所述的生根培养基为：向 1LMS培养基中加入香蕉汁5-15mg、蛋白胨5-15mg、白芨提取物1-6mg、丹参汁2-5mg、黄芪提取物3-9mg、白花蛇舌草提取物5-10mg、甘草提取物1-5mg 和大枣提取物6-12mg，混匀，即得。

前述的幼苗长势好的铁皮石斛的组织养方法中，所述的生根培养基为：向 1LMS培养基中加入香蕉汁8-12mg、蛋白胨8-12mg、白芨提取物2-4mg、丹参汁3-4mg、黄芪提取物5-7mg、白花蛇舌草提取物7-8mg、甘草提取物2-4mg 和大枣提取物8-10mg，混匀，即得。