[发明专利]一种幼苗长势好的铁皮石斛的组织养方法

权利要求书

1.一种幼苗长势好的铁皮石斛的组织养方法，其特征在于：取成年态铁皮石斛茎段，用流水冲洗干净后，用0.1%的升汞溶液浸泡3-9分钟，用无菌水冲洗4-5次，置超净工作台上，切成长度为1-2cm、带2-3个节的小茎段，再用0.1%的升汞溶液浸泡1-3分钟，用无菌水冲洗4-5次后，接种于无菌诱导培养基中，在温度24-26℃、日光灯照射24小时/天、光照强度800-1200lx下培养40天后，茎段在节间处长出幼苗，待幼苗长至1-2cm后，转接到生根培养基中生根，在光照为2000-3000Lx，温度为20-25℃培养50-60天，即得。

2.如权利要求1所述的幼苗长势好的铁皮石斛的组织养方法，其特征在于：所述的诱导培养基为：向1LMS培养基中加入NAA2.0-4.0mg、土豆泥5-10g和蔗糖15-25g，混匀，即得。

3.如权利要求2所述的幼苗长势好的铁皮石斛的组织养方法，其特征在于：所述的诱导培养基为：向1LMS培养基中加入NAA 3.0mg、土豆泥7g和蔗糖20g，混匀，即得。

4.如权利要求1所述的幼苗长势好的铁皮石斛的组织养方法，其特征在于：所述的生根培养基为：向1LMS培养基中加入香蕉汁5-15mg、蛋白胨5-15mg、白芨提取物1-6mg、丹参汁2-5mg、黄芪提取物3-9mg、白花蛇舌草提取物5-10mg、甘草提取物1-5mg和大枣提取物6-12mg，混匀，即得。

5.如权利要求4所述的幼苗长势好的铁皮石斛的组织养方法，其特征在于：所述的生根培养基为：向1LMS培养基中加入香蕉汁8-12mg、蛋白胨8-12mg、白芨提取物2-4mg、丹参汁3-4mg、黄芪提取物5-7mg、白花蛇舌草提取物7-8mg、甘草提取物2-4mg和大枣提取物8-10mg，混匀，即得。

6.如权利要求5所述的幼苗长势好的铁皮石斛的组织养方法，其特征在于：所述的生根培养基为：向1LMS培养基中加入香蕉汁10mg、蛋白胨10mg、白芨提取物3mg、丹参汁4mg、黄芪提取物6mg、白花蛇舌草提取物7mg、甘草提取物2mg和大枣提取物9mg，混匀，即得。

7.如权利要求4-6中任一项所述的幼苗长势好的铁皮石斛的组织养方法，其特征在于：所述的白芨提取物这样制备：取白芨，加入8-10倍量的水浸泡10-15min后，煎煮1-2h，过滤，滤渣再加入5-6倍量水提取2-3次，每次20-30min，过滤，合并滤液，浓缩成浓缩液后，备用；滤渣再加入5-6倍量50-60%的乙醇溶液，回流提取2-3次，每次20-30min，过滤，合并滤液，回收乙醇，得醇提取液，醇提液与上述水提液合并，浓缩至50-60℃时相对密度为1.10-1.20的浸膏，干燥，粉碎，即得。

8.如权利要求4-6中任一项所述的幼苗长势好的铁皮石斛的组织养方法，其特征在于：所述的黄芪提取物这样制备：取黄芪，加入6-8倍量60-70%的乙醇溶液回流提取2-3次，每次20-30min，过滤，合并滤液，回收乙醇，得醇提取液，浓缩成浓至50-60℃时相对密度为1.10-1.20的浸膏，干燥，粉碎，即得。

9.如权利要求4-6中任一项所述的幼苗长势好的铁皮石斛的组织养方法，其特征在于：所述的甘草提取物这样制备：取甘草，洗净，晾干后，置于润药容器内，用喷淋的方法喷洒食醋，边喷洒边搅拌直至均匀，接着闷润35分钟至醋液完全被甘草药材吸尽后，加热，炒至黄颜色略干时，取出放凉6h后，于34-40℃下干燥85小时，粉碎成粗颗粒，即得，期间每12小时翻药一次，甘草与食醋的重量比为35:3；取上述甘草颗粒，加入9倍量浓度为80%的乙醇提取2次，每次1.5小时，提取液合并，过滤，滤液回收乙醇并浓缩至50-60℃时相对密度为1.10-1.20的浸膏，浸膏干燥，粉碎，即得。

10.如权利要求4-6中任一项所述的幼苗长势好的铁皮石斛的组织养方法，其特征在于：所述的白花蛇舌草提取物这样制备：取白花蛇舌草，加8-10倍量水煎煮,2-3h后，过滤，滤液浓缩至50-60℃时相对密度为1.10-1.20的浸膏，即得；所述的大枣提取物这样制备：取大枣，加8-10倍量水煎煮,2-3h后，过滤，滤液浓缩至50-60℃时相对密度为1.10-1.20的浸膏，即得；所述的丹参汁这样制备：丹参加3-5倍量水，打成汁，即得。