[发明专利]一种检测滤纸干血片中肌酸激酶的试剂盒及其制备方法

说明书

本发明公开了一种可以检测滤纸干血片中肌酸激酶的试剂盒，包括：酶试剂、铜试剂、反应板、纸片标准品和纸片质控品。另外本发明还公开了一种可以检测滤纸干血片中肌酸激酶的试剂盒的制备方法以及一种检测滤纸干血片中肌酸激酶的方法。本发明试剂盒可实现采血量极少即可检测血中肌酸激酶，用其检测滤纸干血片中肌酸激酶具有快速、特异性高、稳定、准确等特点。

技术领域

本发明涉及肌酸激酶的检测，尤其是一种检测滤纸干血片中肌酸激酶的试剂盒及其制备方法。

背景技术

肌酸激酶（CK），主要存在于骨骼肌和心肌，在脑组织中也存在，是参与体内的能量代谢的一种酶。肌酸激酶在临床诊断中具有重要的意义，在各种病变包括肌肉萎缩和心肌梗塞、病毒性心肌炎发生时，肌酸激酶（CK）升高。目前在临床上主要用于诊断心肌梗塞，认为在心肌梗塞的诊断中，测定肌酸激酶的水平检测比做心电图更为可靠。心肌梗死时，肌酸激酶在2~4小时开始升高，24小时达到高峰，3~4日恢复正常。肌酸激酶由于其具有重要的临床应用价值，已引起人们广泛的重视和深入的研究。

肌营养不良症是指一组以进行性加重的肌无力和支配运动的肌肉变性为特征的遗传性疾病群。肌营养不良症包括先天性肌营养不良症、其他BECKER型MD等多种类型。部分肌营养不良症会导致运动受损甚至瘫痪。先天性肌营养不良症 (CMD) 是指一组特征为出生时或在婴儿期肌无力的一组遗传性神经肌肉紊乱。受影响的婴儿会表现出肌肉张力差，很少运动。儿童的生活和寿命质量都受到发展式肌营养不良症、呼吸妥协和脊柱强直影响。分区蛋白缺陷型先天性肌营养不良症 (MDC1A) 是最常见和最严重的先天性肌营养不良症，占全部 CMD 确诊病例的 30-40％。MDC1A 的特点是先天性肌张力低下、明显的关节挛缩、以及缺乏独立行走能力。由于出现呼吸问题，通常需要安置饲管和进行正压通气。MDC1A尚无疗法，患者通常在他们到达10岁的年龄前死亡。因此，幼儿肌营养不良的筛查非常重要。然而现有方法以血清为标本，采血量大，因此现有肌酸激酶测定试剂盒并不适用于新生儿和低龄儿童肌酸激酶活性的测量。

自上个世纪60年代，Robert Guthrie等人首次建立了滤纸干血片法，并用于新生儿苯丙酮尿症（PKU）的检查以来，以滤纸干血片作为检测样本已在新生儿疾病筛查领域形成共识，并在产前筛查及激素检测方面广泛应用。

目前需要一种只需要采较少血量，就能快速检测肌酸激酶的方法，满足新生儿、低龄儿童疾病筛查。

发明内容

基于此，本发明为解决只需要采少量血就能快速检测肌酸激酶的技术问题，提供一种能检测滤纸干血片中肌酸激酶（CK）试剂盒，以达到只需要采少量血就能快速检测肌酸激酶的效果。

本发明所要解决的上述技术问题，通过以下方案予以实现：

本发明提供一种能检测滤纸干血片中肌酸激酶（CK）试剂盒，包括：酶试剂、铜试剂、反应板、纸片标准品和纸片质控品。

优选的，所述酶试剂包含试剂R1-1，R1-2，R2；其中，R1-1试剂包含80~110mmol/L的咪唑缓冲液，1~5mmol/L的NADP，5~10KU/L的己糖激酶，1~20mmol/L的醋酸镁，1~10mmol/L的AMP，0.01~1mmol/L的磷酸腺苷，0.5~5mmol/L EDTA，1~100mmol/L的葡萄糖；R1-2试剂包含1~10mmol/L EDTA，0.1~1mmol/L N-乙酰半胱氨酸，100~1000mmol/L的SH稳定剂；R2试剂包含1~100KU/L G6PDH，1~20mmol/L ADP，10~50mmol/L的磷酸肌酸，10~20mmol/L的防腐剂，100~200mmol/L的磷酸。

所述铜试剂包含0.1~1g/L的CuSO4·5H2O，1~10g/L的Na2CO3，0.1~1‰g/L的酒石酸钾钠。