[发明专利]一种即时检测淋球菌的荧光恒温检测试剂盒

权利要求书

1.一种即时检测淋球菌的荧光恒温检测试剂盒，包括反应液、启动液、反应酶系、特异性引物探针，其特征在于：所述反应液含有四甲基氯化铵，启动液含有乙酸镁，反应酶系含有修饰聚合酶。

2.根据权利要求1所述的一种即时检测淋球菌的荧光恒温检测试剂盒，其特征在于：所述反应液包括：

Tris-HCl 20-70mM

KCl 30-90mM

四甲基氯化铵 100-300μM

二硫苏糖醇 1-4mM

甜菜碱 0.1-2M

海藻糖 3-8%

PEG 3-8%

BSA 0.05-0.2mg/mL。

3.根据权利要求1所述的一种即时检测淋球菌的荧光恒温检测试剂盒，其特征在于：所述启动液包括：

乙酸镁 5mM~20mM。

4.根据权利要求1所述的一种即时检测淋球菌的荧光恒温检测试剂盒，其特征在于：所述反应酶系包括：

dNTPs 100-300uM

修饰聚合酶 20-100U

单链结合蛋白 200-300ng/ul

重组酶 300-400ng/ul

上游引物 100-300nM

下游引物 100-300nM

荧光探针 50-70nM

重组酶为不依赖于能量分子的重组酶。

5.根据权利要求4所述的一种即时检测淋球菌的荧光恒温检测试剂盒，其特征在于：所述上游引物、下游引物及荧光探针序列为：

检测淋球菌的上游引物序列：CCAGAGCTTGGCGGTACATACCACAGAAA；

下游引物的序列为：TTGCTGCGTGATTGCTCTCTAATTCCGCTAA；

荧光探针序列为： ATTCCTTCTCGGTCGCTTTGCGATTGCGCTCCAAGT。

6.根据权利要求2所述的一种即时检测淋球菌的荧光恒温检测试剂盒，其特征在于：Tris-HCl的pH为7.0～9.0。

7.根据权利要求4所述的一种即时检测淋球菌的荧光恒温检测试剂盒，其特征在于：所述重组酶选自E.coli RecT蛋白、λ噬菌体β蛋白、啤酒酵母SepΙ/STPβ、啤酒酵母DPA蛋白、啤酒酵母STPα蛋白、粟酒裂殖酵母p140/Exoǁ蛋白或RrpΙ、HPP-Ι、v-SEP、ICP8蛋白中的一种或多种。

8.根据权利要求4所述的一种即时检测淋球菌的荧光恒温检测试剂盒，其特征在于：所述聚合酶为经基因工程修饰的在35℃下低活性的修饰聚合酶，浓度为20-100U，优选50U。

9.根据权利要求1-7所述的一种即时检测淋球菌的荧光恒温检测试剂盒，其特征在于：恒温扩增的温度为35～42℃。

10.根据权利要求1-4所述的一种即时检测淋球菌的荧光恒温检测试剂盒，其特征在于：所述启动液浓度为10mM。