[发明专利]单子叶植物不同存在形式氨基酸的分离提取方法

说明书

本发明公开了一种单子叶植物不同存在形式氨基酸的分离提取方法，属于氨基酸分离提取技术领域。具体的方法为将所述单子叶植物的茎或叶片中通过水浸、抽真空和离心的方法分离出细胞间隙液；将分离出细胞间隙液后的茎或叶片剪碎，冰浴内制浆、离心浆液，得细胞内液和固体残渣；分别检测所述细胞间隙液和所述细胞内液中可溶的游离氨基酸含量和可溶的蛋白水解氨基酸的含量，并检测固体残渣中的不可溶的蛋白水解氨基酸的含量，得不同存在形式氨基酸的含量。该方法真实反映出氨基酸在植物体内的分布与运输，这对于探索植物生理、代谢、发育具有极其深远的理论和实际应用价值。

技术领域

本发明涉及氨基酸分离提取技术领域，特别是涉及一种适用于单子叶植物不同存在形式氨基酸的分离提取方法。

背景技术

氨基酸是生物功能大分子蛋白质的基本组成单位，在植物组织中合成，也可由蛋白质水解得到，在组织的代谢、生长、维护和修复过程中起重要作用。氨基酸在植物体内主要以5种形式存在：①细胞间隙液中可溶的游离氨基酸；②细胞间隙液中可溶的蛋白水解氨基酸；③细胞内可溶的游离氨基酸；④细胞内可溶的蛋白水解氨基酸；⑤细胞内不可溶的蛋白水解氨基酸。

氨基酸通过代谢可以发挥的作用包括：①合成组织蛋白质；②变成酸、激素、抗体、肌酸等含氨物质；③转变为碳水化合物和脂肪；④氧化成二氧化碳和水及尿素，产生能量等。不同存在形式的氨基酸，种类、比例、含量、生理功能各有不同，如果能将其分类提取检测，对研究植物生理、代谢、发育等有着极其深远的理论和实际应用价值。

目前氨基酸检测还停留在总的游离氨基酸或者总的水解氨基酸水平，各种存在形式的氨基酸尚无法得到有效的分离提取；若不能有效分离，得到的数据就不能真实反映氨基酸在植物体内的分布与运输，这对于探索植物生理、代谢、发育会造成极大的干扰。

发明内容

本发明实施例针对现有提取方法不能将各存在形式氨基酸有效分离的不足，提供一种单子叶植物不同存在形式氨基酸的分离提取方法。

为解决上述技术问题，本发明实施例所采取的技术方案是：一种单子叶植物不同存在形式氨基酸的分离提取方法，包括以下步骤：

步骤一、取单子叶植物的茎或叶片，切段，得茎段或叶段；

步骤二、将所述茎段或叶段用水浸没，并抽真空至所述茎段或叶段呈水渍状；

步骤三、将呈水渍状的茎段或叶段晾至表面无水，离心，得细胞间隙液；

步骤四、将所述细胞间隙液分为两份，分别检测所述细胞间隙液中可溶的游离氨基酸含量和可溶的蛋白水解氨基酸的含量；

步骤五、将步骤三中离心后的茎段或叶段剪碎、在冰浴中研磨成匀浆，离心，得细胞内液和固体残渣；

步骤六、将所述细胞内液分为两份，分别检测所述细胞内液中可溶的游离氨基酸含量和可溶的蛋白水解氨基酸的含量；并检测所述固体残渣中的不可溶蛋白水解氨基氨酸的含量。

采用上述技术方案所产生的有益效果在于：本发明实施例将单子叶植物茎或叶片中的细胞间隙液和细胞内液分离提取，分别检测了细胞间隙液和细胞内液中可溶的游离氨基酸含量和可溶的蛋白水解氨基酸的含量；提取细胞间隙液和细胞内液后的固体残渣用于检测细胞内不可溶蛋白水解氨基酸的含量；通过本发明的方法可以将不同存在形式的氨基酸准确检测，真实反映出氨基酸在植物体内的分布与运输，这对于探索植物生理、代谢、发育具有极其深远的理论和实际应用价值。

附图说明

图1是小麦不同部位细胞内液中的游离氨基酸含量柱状图。

具体实施方式

为了使本发明所要解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。