[发明专利]一种固相抗体双夹心免疫反应体系及其试剂盒与应用

权利要求书

1.一种固相抗体双夹心免疫反应体系，其特征在于，所述免疫反应体系采用全固相待反应组分，通过将检测抗体固相化，预置到反应孔或反应管中，待样本加入反应孔或反应管后，孵育后即可完成免疫反应；

所述检测抗体固相化的方法为：将检测抗体预制微球或将检测抗体冻干。

2.根据权利要求1所述的免疫反应体系，其特征在于，所述将检测抗体预制微球或将检测抗体冻干的方法包括以下步骤：

S01. 将检测抗体与保护剂混合得混合物A；

S02. 将混合物A于-5～-196℃冷冻；

S03. 将步骤S02中冷冻的混合物A保持温度在0℃以下，抽真空；

S04. 将步骤S03中抽真空后的混合物A干燥0.5～48小时，得固相检测抗体。

3.根据权利要求1所述的免疫反应体系，其特征在于，所述检测抗体固相化的方法还包括将检测抗体表面包裹薄膜。

4.根据权利要求3所述的免疫反应体系，其特征在于，所述将检测抗体表面包裹薄膜的方法为：对冻干后的或微球化的抗体表面进行喷金处理。

5.根据权利要求4所述的免疫反应体系，其特征在于，所述喷金处理的条件为电流10～50mA，时间20～300秒；所述喷金处理采用的设备为离子溅射镀膜仪。

6.根据权利要求2所述的免疫反应体系，其特征在于，步骤S01所述保护剂的配方为：

干酪素 0.5%～10%；

牛血清白蛋白 0.5%～10%；

蔗糖 0.5%～10%；

海藻糖 0.5%～10%；

聚乙二醇（PEG） 0.5%～10%；

聚乙烯吡咯烷酮（PVP） 0.5%～10%。

7.根据权利要求1所述的免疫反应体系，其特征在于，所述检测抗体为酶联抗体、荧光标记抗体、吖啶脂标记抗体或生物素标记抗体。

8.一种固相抗体双夹心免疫反应试剂盒，其特征在于，所述试剂盒采用权利要求1至7任一所述固相抗体双夹心免疫反应体系，所述试剂盒包括：反应孔或反应管、反应底物、抗原标准品、洗涤液、稀释液。

9.权利要求8所述试剂盒的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

S11. 制备固相化的检测抗体；

S12. 将含有捕获抗体的缓冲液加入反应装置中，使捕获抗体吸附于反应孔或反应管中；

S13. 将步骤S11制备的检测抗体预置到反应孔或反应管中；

S14. 配制抗原标准品、洗涤液、稀释液。

10.权利要求8所述试剂盒在免疫检测方面的应用，其特征在于，所述应用的方法为包括以下步骤：

S21. 在反应孔或反应管中加入待测样品，孵育；

S22. 弃去多余样品，洗涤，加入反应底物；

S23. 观察或检测反应结果。