[发明专利]一种独一味药材及其制剂的UPLC指纹图谱检测方法

说明书

本发明公开了一种独一味药材及其制剂的UPLC指纹图谱检测方法，方法包括：(a)对照品溶液的制备；(b)供试品溶液的制备；(c)UPLC检测条件；(d)以胡麻属苷、咖啡酸、绿原酸、山栀苷甲酯、马钱苷、8‑O‑乙酰山栀苷甲酯、连翘酯苷B、木犀草苷、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷等为参照峰的标准指纹图谱的制定；(e)指纹图谱的质量控制。该方法供试液制备提取溶剂环保，方法简单，不仅较传统HPLC方法更为简便迅速、节能减耗，且所得的独一味药材及制剂指纹图谱中各特征峰分离效果较好，特征性成分及药效成分保留完整，重复性、稳定性良好，精密度高，专属性强。本法能够准确、快速控制独一味药材及其制剂。

技术领域

本发明涉及一种中药材及其制剂的UPLC指纹图谱技术领域，尤其是独一味药材及其制剂的UPLC指纹图谱检测方法。

背景技术

UPLC技术是完全基于HPLC基本原理的技术，是以亚二微米小颗粒、超高柱效的填料为核心的技术。目前在中药及中成药领域，UPLC的使用正在走向成熟。其与HPLC相比，既保留了高效液相色谱的所有优点，且具有省时、节能、环保的独特优势。

独一味药材为唇形科植物独一味Lamiophlomis Rotata(Benth.)Kudo的干燥地上部分，是藏族、蒙古族、纳西族等民族用于止血、镇痛等的常用药。目前独一味广泛分布在甘肃、四川、云南、西藏、青海、内蒙古等地。其性甘、苦，平；归肝经。具有活血止血，祛风止痛的功效；常用于跌打损伤，外伤出血，风湿痹痛，黄水病。目前市面上以独一味药材入药的单味药制剂多数为止血镇痛抗炎的良药：如成都九芝堂金鼎药业有限公司止血镇痛胶囊；甘肃康县独一味生物制药有限责任公司的独一味片、独一味胶囊、独一味软胶囊。

目前已有相关报道以UPLC技术对独一味药材及其制剂进行含量测定、以HPLC技术对独一味药材及其制剂进行指纹图谱质量控制，然而，未有采用UPLC法对独一味药材及其制剂进行指纹图谱质量控制的方法，且现有技术中最多同时检测独一味药材中的8种成分，本法应用UPLC技术以尽快的速度保留独一味药材及其制剂尽可能多的有效成分，并测定了独一味药材中10个指标性成分、独一味制剂中9个指标性成分，分别建立其标准图谱，对独一味药材及其制剂的快速鉴别有重要的意义。

发明内容

本发明提供一种高效准确、简单迅速检测独一味药材及其制剂的UPLC指纹图谱检测方法及其指纹图谱，利用该图谱可快速简便地监控独一味药材及其制剂的质量。本发明技术方案如下：

一种独一味药材及其制剂的UPLC指纹图谱检测方法及其指纹图谱，包括如下步骤：

(1)对照品溶液的制备：

分别称取胡麻属苷、咖啡酸、绿原酸、山栀苷甲酯、马钱苷、8-O-乙酰山栀苷甲酯、连翘酯苷B、木犀草苷、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷对照品，置于容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，制成对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备：

分别称取独一味药材、独一味制剂粉末(过四号筛)，置具塞三角锥形瓶中，加乙醇或10～50％甲醇或水，称重，回流提取45～75min，放冷，再称定重量，用同种溶剂补重，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液，即分别得到独一味药材及其制剂供试品溶液；

(3)UPLC检测：

色谱条件为：色谱柱为C₁₈反相色谱柱(2.1×150mm,1.7μm)；柱温为30～40℃；检测波长为235nm；流动相A为乙腈，流动相B为0.1％～0.5％甲酸溶液，梯度洗脱，总流速为0.3～0.6ml/min，分析时间62分钟；所述梯度洗脱顺序表如下：

表1 梯度洗脱顺序表

(4)以8-O-乙酰山栀苷甲酯为参照峰的标准指纹图谱的制定