[发明专利]一种携带Beacon标签的嵌合抗原受体T细胞改造技术

说明书

本发明涉及一种携带Beacon标签的嵌合抗原受体T细胞改造技术。具体地，涉及一种嵌合抗原受体融合蛋白，其从N末端至C末端包含：(i)包含VH和VL的单链可变片段(scFv)，其中scFv具有抗肿瘤抗原的活性，(ii)跨膜结构域，(iii)至少一个共刺激域，和(iv)激活域；其中所述的融合蛋白还包含一Beacon标签，所述Beacon标签连接至VH的N端、或位于VH和VL之间、或位于VL和跨膜结构域之间。本发明的先进的携带Beacon标记的嵌合抗原受体T细胞临床治疗恶性肿瘤，具有针对性和高效性。

技术领域

本发明涉及肿瘤治疗技术领域，更具体地涉及一种携带Beacon标签的嵌合抗原受体T细胞改造技术。

背景技术

免疫治疗是一种非常有前途的治疗癌症的方法。T细胞或T淋巴细胞是免疫系统有效的武器，它们能够持续性地帮我们区分正常细胞和外来抗原或非正常细胞，如癌症或被感染的细胞。基因修饰的嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)是设计肿瘤特异性T细胞的常见方案。将靶向肿瘤相关抗原(TAA)的CAR-T细胞输入患者(称为过继细胞转移或ACT)，这代表了一种有效的免疫治疗方法。与化疗或抗体技术相比，CAR-T技术的优点在于重编程的T细胞可以增殖并在患者体内持续存在(“活的药物”)。

CAR(嵌合抗原受体)通常是由一个单克隆抗体衍生的单链可变区片段(scFv)通过铰链和跨膜结构域连接到可变数目的胞内信号结构域：单个细胞活化的CD3-ζ结构域；以及和CD3-ζ结构域相连的CD28，CD137(4-1BB)或其他共刺激域(也可用CD27信号结构域代替CD28或CD137结构域)。CAR的发展从第一代(没有共刺激域)到第二代(具有一个共刺激域)到第三代CAR(具有多个共刺激域)。生成的具有多个共刺激域的CAR(即所谓的第三代CAR)会产生增加的细胞溶解活性，并显着改善CAR-T细胞的持续性，表现出增强的抗肿瘤活性。

目前还没有专门针对高表达的恶性血癌，如淋巴癌，白血病、骨髓瘤的抗原而开发的嵌合抗原受体T细胞Beacon标签蛋白改造技术。

发明内容

本发明的目的在于提供一种携带Beacon标签的嵌合抗原受体T细胞改造技术。

具体地，本发明的嵌合抗原受体中包含的Beacon标签可以更有效地增加嵌合抗原受体T细胞的功能活性，更有效地攻击和杀死肿瘤细胞。

在本发明的第一方面，提供了一种嵌合抗原受体融合蛋白，其从N端至C端包含：

(i)由重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)组成的单链可变区片段scFv，其中所述的scFv具有抗肿瘤抗原活性；

(ii)跨膜结构域；

(iii)至少一个共刺激域；和

(iv)激活域；

其中，所述的融合蛋白还包含一Beacon标签，所述Beacon标签连接至VH的N端、或位于VH和VL之间、或位于VL和跨膜结构域之间。

在另一优选例中，所述的Beacon标签位于scFv和跨膜结构域之间。

在另一优选例中，所述的嵌合抗原受体融合蛋白不包含共刺激域，或者包含一个共刺激域，或者包含两个共刺激域或两个以上共刺激域。

在另一优选例中，所述的肿瘤抗原选自下组：