[发明专利]一种携带Beacon标签的嵌合抗原受体T细胞改造技术

权利要求书

1.一种嵌合抗原受体融合蛋白，其特征在于，其从N端至C端包含：

(i)由重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)组成的单链可变区片段scFv，其中所述的scFv具有抗肿瘤抗原活性；

(ii)跨膜结构域；

(iii)至少一个共刺激域；和

(iv)激活域；

其中，所述的融合蛋白还包含一Beacon标签，所述Beacon标签连接至VH的N端、或位于VH和VL之间、或位于VL和跨膜结构域之间。

2.如权利要求1所述的嵌合抗原受体融合蛋白，其特征在于，所述的肿瘤抗原选自下组：

VEGFR-2、CD19、CD20、CD30、CD22、CD25、CD28、CD30、CD33、CD52、CD56、CD80、CD86、CD81、CD123、cd171、CD276、B7H4、CD133、EGFR、GPC3、PMSA、CD3、CEACAM6、c-Met、EGFRvIII、ErbB2、ErbB3HER-2、HER3、ErbB4/HER-4、EphA2、IGF1R、GD2、O-acetyl GD2、O-acetyl GD3、GHRHR、GHR、Flt1、KDR、Flt4、CD44V6、CEA、CA125、CD151、CTLA-4、GITR、BTLA、TGFBR2、TGFBR1、IL6R，gp130、Lewis、TNFR1、TNFR2、PD1、PD-L1、PD-L2，HVEM、MAGE-A、mesothelin、NY-ESO-1、PSMA、RANK、RORl、TNFRSF4、CD40、CD137、TWEAK-R、LTPR、LIFRP、LRP5、MUC1、TCRa、TCRp、TLR7、TLR9、PTCH1、WT-1、Robol、Frizzled、OX40、CD79b和Notch-1-4；

较佳地，所述肿瘤抗原为CD19。

3.如权利要求1所述的嵌合抗原受体融合蛋白，其特征在于，所述的共刺激域选自下组：CD28、4-1BB，ICOS-1、CD27、OX-40和DAP10；

较佳地，所述的共刺激域是CD28。

4.如权利要求1所述的嵌合抗原受体融合蛋白，其特征在于，所述的Beacon标签的氨基酸序列如SEQ ID NO.:3所示。

5.如权利要求1所述的嵌合抗原受体融合蛋白，其特征在于，所述的嵌合抗原受体融合蛋白的结构为CD19 ScFv-Beacon-CD28-CD3。

6.一种核酸分子，其特征在于，所述的核酸分子编码权利要求1所述的嵌合抗原受体融合蛋白。

7.如权利要求6所述的核酸分子，其特征在于，所述的核酸分子如SEQ ID NO:1所示，或所述核酸分子的序列与SEQ ID NO.:1的同源性至少95％。

8.一种载体，其特征在于，所述载体含有权利要求6所述的核酸分子。

9.一种宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞含有权利要求8所述的载体或染色体中整合有外源的权利要求6所述的核酸分子或表达权利要求1所述的CAR。

10.一种制剂，其特征在于，所述制剂含有权利要求1所述的嵌合抗原受体、权利要求6所述的核酸分子、权利要求8所述的载体、或权利要求9所述的细胞，以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。