[发明专利]一种紫苑石斛的组织培养育苗方法

说明书

本发明公开了一种紫苑石斛的组织培养育苗方法，包括：外植体选择步骤、果荚消毒步骤、播种步骤、继代培养步骤、生根培养步骤、炼苗驯化步骤和移栽步骤。该紫苑石斛的组织培养育苗方法能够有效的提高紫苑石斛种苗的繁育速度及繁育数量，从母本源头控制种质的稳定性，保证种苗质量，实现紫苑石斛优质种子种苗的工厂化生产，满足生产需求，缓解资源稀缺的现况。

技术领域

本发明涉及组织培养技术领域，尤其涉及一种紫苑石斛的组织培养育苗方法。

背景技术

紫苑石斛(Dendrobium transparens)为兰科，主要分布在缅甸，中国境内主要分布在广西，多数从缅甸国家进口；紫苑石斛茎下垂，稍肉质，圆柱形，不分枝，具多节。总状花序多个，长至落叶的老茎上，每个花柄通常有2朵花，花型大成粉紫色，膜质，开展；花瓣近椭圆形，唇瓣卵圆形呈粉紫色，两侧围抱蕊柱形成喇叭状，喇叭状部位呈深紫色。紫苑石斛资源稀少、花色清新靓丽、有淡淡的清香味，花期长达2个月，具有较高的观赏价值。

但是，现有的紫苑石斛存在以下缺陷：目前国内市场上流通的紫苑石斛主要靠从缅甸国家进口，少部分来源于广西，尚无人工栽培，母本较少，种源稀缺；一般通过分株繁殖和扦插的方式进行繁殖，繁殖种苗较少，繁殖率低，生长周期较长，正常生长环境下不经人工授粉结果的几率较小；由于果荚少，果粉细小，在自然环境下不易萌发生长等诸多因素的制约，使得具有高观赏价值的紫苑石斛种苗繁育受阻。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种紫苑石斛的组织培养育苗方法，能够有效的提高紫苑石斛种苗的繁育速度及繁育数量，从母本源头控制种质的稳定性，保证种苗质量，实现紫苑石斛优质种子种苗的工厂化生产，满足生产需求，缓解资源稀缺的现况。

本发明的目的采用如下技术方案实现：

一种紫苑石斛的组织培养育苗方法，包括：

外植体选择步骤：在紫苑石斛母本植株的开花期进行人工授粉，长出果荚后，继续培育，采摘成熟果荚并置于冰箱中保存，得到备用果荚；

果荚消毒步骤：取所述备用果荚，将种壳表面清洗干净，得到第一洁净果荚；将所述第一洁净果荚移至接种室中，进行酒精消毒和无菌水冲洗，得到第二洁净果荚；将所述第二洁净果荚用次氯酸钠消毒和无菌水冲洗，得到第三洁净果荚；将所述第三洁净果荚用升汞消毒和无菌水冲洗，得到第四洁净果荚；

播种步骤：解剖所述第四洁净果荚，将果粉撒到1/2MS培养基上，转移至培养室中培养，得到萌芽种子；

继代培养步骤：将所述萌芽种子置于培养室中继续培养，直至种苗长到2-3cm，获取一级瓶苗；将所述一级瓶苗转移至1/2MS培养基中，生长至5-6cm时，获取二级瓶苗；

生根培养步骤：将所述二级瓶苗转移至生根培养基中进行培养，获取生根瓶苗；

炼苗驯化步骤：将所述生根瓶苗置于培养室中培养，然后移到室外环境中进行驯化，获取驯化苗；

移栽步骤：将所述生根培养基的瓶盖打开，继续放置所述驯化苗3-5天，然后倒出，并用多菌灵浸泡苗根部，接着洗净阴干，移栽至基质中进行驯化。

进一步地，在所述外植体选择步骤中，紫苑石斛母本植株的植株年龄为2-4年；长出果荚后继续培育3-4个月；将所述成熟果荚置于3-7℃的冰箱中保存1.5-2.5周。