[发明专利]一种红根野蚕豆茎段组织培养育苗方法

权利要求书

1.一种红根野蚕豆茎段组织培养育苗方法，其特征在于，包括：

外植体选择步骤：将红根野蚕豆种子播种后置于培养瓶中，继代培养直至种苗长到10-12cm，获取一级瓶苗；

接种步骤：取出一级瓶苗，经过消毒后，取出种苗，切除种苗茎杆上的叶子和叶柄，然后再将种苗茎杆切成若干个茎段，每个茎段至少带一个腋芽，然后将若干个茎段移栽到1/2MS培养基上进行培养，得到接种茎段；

增殖培养步骤：将接种茎段转入培养室内进行培养，使得茎段的侧芽长到3-5cm，获取二级瓶苗；

生根培养步骤：将所述二级瓶苗转移至生根培养基中进行培养，获取生根瓶苗。

2.如权利要求1所述的红根野蚕豆茎段组织培养育苗方法，其特征在于，外植体选择步骤中，继代培养的时间为70-80天。

3.如权利要求1所述的红根野蚕豆茎段组织培养育苗方法，其特征在于，接种步骤中，消毒过程如下：将一级瓶苗移到接种室内，在无菌操作工作台上进行如下操作；首先撕去一级瓶苗的瓶口上的封口膜，用喷有浓度为75％的酒精的湿抹布擦净瓶体，放到无菌操作工作台上，将瓶盖置于酒精灯附近顺时针消毒2圈，打开瓶盖，瓶口在酒精灯上消毒2圈，用镊子将红根野蚕豆苗取出放到接种盘上。

4.如权利要求1所述的红根野蚕豆茎段组织培养育苗方法，其特征在于，接种步骤中，茎段的长度为1.5-2.5cm。

5.如权利要求1所述的红根野蚕豆茎段组织培养育苗方法，其特征在于，接种步骤中，在所述1/2MS培养基中添加0.2mg/L的萘乙酸、2.0mg/L的6-苄基腺嘌呤、浓度为3％的蔗糖、4.5g/L的琼脂粉、35g/L的土豆汁、0.2g/L的活性碳粉，并将培养基的pH调至5.8-6.0。

6.如权利要求1所述的红根野蚕豆茎段组织培养育苗方法，其特征在于，增殖培养步骤中，温度为24℃-26℃，光照强度为2000-2500lx,光照时间为10-12小时/天。

7.如权利要求1所述的红根野蚕豆茎段组织培养育苗方法，其特征在于，增殖培养步骤中，培养14-16天开始长出侧芽，培养58-62天使得茎段的侧芽长到3-5cm。

8.如权利要求1所述的红根野蚕豆茎段组织培养育苗方法，其特征在于，生根培养步骤中，在无菌环境下，将所述二级瓶苗转移至生根培养基中进行培养。

9.如权利要求1所述的红根野蚕豆茎段组织培养育苗方法，其特征在于，生根培养步骤中，生根培养的时间为88-92天。

10.如权利要求1所述的红根野蚕豆茎段组织培养育苗方法，其特征在于，生根培养步骤中，生根培养基为在MS培养基中添加2.0mg/L的萘乙酸、0.5mg/L的6-苄基腺嘌呤、浓度为2％的蔗糖、4.8g/L的琼脂粉、35g/L的土豆汁、25g/L的香蕉汁、1.0g/L的生根粉、0.3g/L的活性碳粉，并将生根培养基的pH调至5.8-6.0。