[发明专利]HLA-C全长基因分型试剂盒在审
| 申请号： | 201711443246.6 | 申请日： | 2017-12-27 |
| 公开（公告）号： | CN108192964A | 公开（公告）日： | 2018-06-22 |
| 发明（设计）人： | 刘建;张倩;段文元;陈守林;马传明;刘晓星;杨海燕;王林林;刘克瑶 | 申请（专利权）人： | 银丰基因科技有限公司;银丰生物工程集团有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6883 | 分类号： | C12Q1/6883;C12Q1/686;C12Q1/6869;C12N15/11 |
| 代理公司： | 山东舜天律师事务所 37226 | 代理人： | 李新海 |
| 地址： | 250101 山东省济南市高*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 测序引物 引物 特异性PCR扩增 分型试剂盒 基因外显子 测序平台 全长基因 外显子测序 标准序列 成本控制 等位基因 扩增引物 利用基因 样本DNA 试剂盒 测序 扩增 配型 通量 兼容 检测 发现 | ||
1.一种HLA-C全长基因分型试剂盒，其特征在于：包括HLA-C基因特异性PCR扩增引物和基因外显子测序引物；
所述HLA-C基因特异性PCR扩增引物序列如下所示：
HLA_CF：TTCTGGAAAGTTCTCAGGTC；
HLA_CR：TCCGCAGTCCCGGTT；
所述基因外显子测序引物，包括HLA-C基因的1、2、3、4、5、6号外显子的测序引物，其序列如下所示：
HLA-C1F：TCTCCCCAGACGCCGAGAT；
HLA-C1R：ACTTCATGGAGTGGGAGC；
HLA-C2F：GAGGGTCGGGCGGGTCTC；
HLA-C2R：GGGCCGTCCGTGGGGGAT；
HLA-C3F：GCGGGGCCAGGGTCTCACA；
HLA-C3R：CTCCCCACTGCCCCTGGTC；
HLA-C4F：GCAAGAGAGAAGCAAAGT；
HLA-C4R：TTCCCTGAGAAGACACATC；
HLA-C5F：GTCAGGGCCCCTCACC；
HLA-C6F：AGGAGGTTCCCCTAAG。
2.根据权利要求1所述的HLA-C全长基因分型试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中还包括常规的PCR扩增所需试剂。
3.一种进行HLA基因分型的方法，其特征在于：包括以下步骤：
1)提取样本DNA；
2)利用上述HLA基因特异性PCR扩增引物，对样本DNA进行PCR扩增，纯化，得到纯化后的HLA基因扩增产物；
3)利用上述基因外显子测序引物，对纯化后的HLA基因扩增产物进行测序PCR扩增，纯化，得到纯化后的测序扩增产物；
4)对纯化后的测序扩增产物进行HLA基因的外显子测序，并与HLA基因的外显子标准序列进行对比，确定HLA基因的型别。
4.根据权利要求3所述的进行HLA基因分型的方法，其特征在于：所述数据库为国际组织IMGT数据库。
5.HLA-C基因特异性PCR扩增引物，其特征在于：序列如下所示：
HLA_CF：TTCTGGAAAGTTCTCAGGTC；
HLA_CR：TCCGCAGTCCCGGTT。
6.HLA-C基因外显子测序引物，其特征在于：C基因的1、2、3、4、5、6号外显子的测序引物，其序列如下所示：
HLA-C1F：TCTCCCCAGACGCCGAGAT；
HLA-C1R：ACTTCATGGAGTGGGAGC；
HLA-C2F：GAGGGTCGGGCGGGTCTC；
HLA-C2R：GGGCCGTCCGTGGGGGAT；
HLA-C3F：GCGGGGCCAGGGTCTCACA；
HLA-C3R：CTCCCCACTGCCCCTGGTC；
HLA-C4F：GCAAGAGAGAAGCAAAGT；
HLA-C4R：TTCCCTGAGAAGACACATC；
HLA-C5F：GTCAGGGCCCCTCACC；
HLA-C6F：AGGAGGTTCCCCTAAG。
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