[发明专利]用于预测心源性猝死易感性的试剂盒

权利要求书

1.引物组在制备预测心源性猝死易感性的试剂盒中的应用，所述引物组由用于检测COL1A2基因上rs3917号插入/缺失多态性位点的特异性引物对、MIR155HG基因上rs72014506号插入/缺失多态性位点的特异性引物对、CTH基因上rs113044851号插入/缺失多态性位点的特异性引物对和DSG2基因上rs397729601号插入/缺失多态性位点的特异性引物对组成；其中

所述COL1A2基因上rs3917号插入/缺失多态性位点的特异性引物对以SEQ ID No.1和SEQ ID No.2、SEQ ID No.3和SEQ ID No.4或SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示的序列分别作为有义引物和反义引物；

所述MIR155HG基因上rs72014506号插入/缺失多态性位点的特异性引物对以SEQ IDNo.7和SEQ ID No.8、SEQ ID No.9和SEQ ID No.10或SEQ ID No.11和SEQ ID No.12所示的序列分别作为有义引物和反义引物；

所述CTH基因上rs113044851号插入/缺失多态性位点的特异性引物对以SEQ ID No.13和SEQ ID No.14、SEQ ID No.15和SEQ ID No.16或SEQ ID No.17和SEQ ID No.18所示的序列分别作为有义引物和反义引物；

所述DSG2基因上rs397729601号插入/缺失多态性位点的特异性引物对以SEQ IDNo.19和SEQ ID No.20、SEQ ID No.21和SEQ ID No.22或SEQ ID No.23和SEQ ID No.24所示的序列分别作为有义引物和反义引物。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：各特异性引物对的5’端标记有荧光染料。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：各特异性引物对的浓度为0.2~1.0μM。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述试剂盒还包括1 U/μL ~ 2.5U/μL耐热DNA聚合酶。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述试剂盒还包括2.5mM~10mM脱氧核糖核苷三磷酸混合液和25 mM~50mM镁盐水溶液。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述镁盐为氯化镁或硫酸镁。

7.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述试剂盒还包括5×PCR或10×PCR反应缓冲液和水。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的应用，其特征在于，用于预测心源性猝死易感性的试剂盒的使用方法包括以下步骤：

（1）采集样品并提取其基因组DNA；

（2）采用权利要求1所述的引物组PCR扩增所述基因组DNA，得到扩增产物；

（3）对所述扩增产物进行分离，进行插入/缺失基因型分析。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，在步骤（2）中的PCR扩增体系为：1μl DNA模板；200μM特异性引物对，有义、反义引物各0.01μl；2.5U/μlTaq DNA聚合酶0.08μl；2.5mMdNTP混合液0.2μl；25 mM镁盐水溶液0.6μl；10×PCR反应缓冲液1μl；去离子水补足至10μl。

10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，在步骤（2）中的PCR扩增条件为：94℃预变性3 min；94℃变性30s，52℃退火30s，72℃延伸1min，30个PCR循环；最后72℃延伸5min。