[发明专利]植物乳杆菌ZJUF HN9及其应用

说明书

本发明公开了一种植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)ZJUF HN9及其应用，属于生物技术领域。植物乳杆菌ZJUF HN9分离自传统发酵剂酸面团，保藏号为CCTCC NO:M 2017341。本发明提供的植物乳杆菌ZJUF HN9具有耐受高含量胆盐的能力，有利于其在肠道中存活和繁殖；在胃肠道环境中具有较高生存率、较强的胃肠粘附力，能显著抑制胃肠道致病菌的繁殖，尤其是鼠伤寒沙门氏菌；此外，该植物乳杆菌具有制备发酵乳的潜力。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)ZJUF HN9及其 应用。

背景技术

植物乳杆菌是一种常见的乳酸菌，广泛存在于发酵食品中，如酸面团、泡菜、酸乳、葡 萄酒等，因此其在食品领域应用广泛。植物乳杆菌与其他益生乳杆菌一样，具有降低胆固醇、 调节免疫以及维持健康肠道菌群等功能(Seddik et al.,2017)。

益生菌发挥益生作用的前提是顺利通过胃的酸性环境以及十二指肠高胆盐环境，以活菌 的状态到达小肠和大肠，进而发挥微生态调整的功能(HoodZottola,1988)。而肠道是乳酸菌 最终定值部位，正常生理情况下胆盐的残留量约为0.05％-2.0％(Ruiz etal.,2013)。因此在益生 菌筛选工作中，对胆盐的耐受是益生菌必备的生理特征。

胆盐是肝细胞分泌的胆汁酸分别与钠或钾结合形成的盐类，如甘氨胆酸钠、牛磺胆酸钠 等。胆盐是胆汁的主要成分之一，在人体中可以促进脂肪的消化和吸收、促进胆固醇代谢、 激活胰酶等。胆盐是一种阴离子表面活性剂，对细胞膜的磷脂双分子层有很强的破坏作用， 改变细胞的通透性，从而造成细胞损害或者死亡(Begley et al.,2005)。

现有研究表明，从生境中筛选得到的野生型乳酸菌，绝大多数对胆盐的耐受性能较差， 从胃肠道或阴道中筛选得到的乳酸菌的耐受能力相对较好。从传统发酵食品中筛选得到的对 胆盐耐受能力较好的，有发酵乳杆菌(Bao et al.,2010)、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌(Guo et al., 2009)，耐受较高浓度胆盐的植物乳杆菌仍未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)ZJUF HN9，该植物乳杆 菌具有优异的耐受高含量胆盐的能力，其耐受胆盐浓度达到0.3％-1.8％，可以确保其在肠道 中的生存、繁殖，为提高益生菌胆盐耐受性提供研究基础。

本发明从北方做馒头用的传统发酵剂酸面团中分离筛选得到一菌株HN9，经16SrRNA 基因比对，鉴定该菌株为植物乳杆菌，命名为植物乳杆菌ZJUF HN9(LactobacillusplantarumZJUF HN9)。植物乳杆菌ZJUF HN9的16S rRNA的碱基序列如SEQ ID NO.1所示。将植物乳杆菌ZJUF HN9于2017年6月16日保藏于中国典型培养物保藏中心(地址：中国， 武汉，武汉大学)，保藏号为：CCTCC NO:M 2017341。

体外实验证明，植物乳杆菌ZJUF HN9具有耐受胃肠道转运液的能力，在模拟人工胃肠 道环境中具有很高的生存率，而且能耐受较高浓度(1.8％)的胆盐，有利于其在胃肠道中存活 或繁殖。植物乳杆菌ZJUF HN9自凝率24小时达到84％，能够选择性粘附革兰氏阴性菌(特 指大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌)，其在肠道中与致病菌凝集，并顺利排出体外，有利于肠道健 康。植物乳杆菌ZJUF HN9能够显著抑制胃肠道致病菌的繁殖，如大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏 菌、金黄色葡萄球菌、李斯特菌。因此，植物乳杆菌ZJUF HN9可用于预防或调节胃肠道菌 群失衡。

本发明的另一个目的是提供植物乳杆菌ZJUF HN9在制备抑制胃肠道致病菌的药物或食 品中的应用。

作为优选，所述胃肠道致病菌为大肠杆菌或鼠伤寒沙门氏菌。