[发明专利]一种富集人血液MNCs的方法有效
| 申请号： | 201711404537.4 | 申请日： | 2017-12-22 |
| 公开（公告）号： | CN108103018B | 公开（公告）日： | 2020-06-26 |
| 发明（设计）人： | 张洪钿;苑春慧 | 申请（专利权）人： | 北京再生生物科技研究院有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/078 | 分类号： | C12N5/078 |
| 代理公司： | 北京纽乐康知识产权代理事务所(普通合伙) 11210 | 代理人： | 白明珠 |
| 地址： | 100085 北京市海淀*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 富集 血液 mncs 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种富集人血液MNCs的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：采集血样本；
S2：通过血样本离心后吸出富集单个核细胞MNCs；
S3：富集MNCs利用密度梯度离心法分离得到MNCs，
所述步骤S2进一步包括如下步骤：将血样本转移至50mL离心管离心，其中，50mL离心管中由上到下分为两层，下层为细胞层，上层为血浆层，距离血浆层1cm至距离细胞层0.5cm之间的血浆层和细胞层为富集MNCs层，以无菌巴氏吸管吸出富集MNCs，合并细胞悬液。
2.根据权利要求1所述的富集人血液MNCs的方法，其特征在于，所述步骤S3进一步包括如下步骤：在50mL离心管中加入淋巴分离液20mL，将富集MNCs以生理盐水定容至25mL，铺到淋巴细胞分离液液面上，25mL/支，取400g水平离心20分钟，吸出中间环状白膜层，以生理盐水洗涤2次，收集沉淀细胞。
3.根据权利要求1所述的富集人血液MNCs的方法，其特征在于，所述血样本为血量和抗凝剂之和。
4.根据权利要求1-3任一项所述的富集人血液MNCs的方法，其特征在于，血样本的提供者无乙肝、丙肝、梅毒、HIV-I/II病毒感染，无细菌、支原体感染，采集后行CD34表型检测、淋巴细胞计数检验。
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