[发明专利]一种牛种布氏菌弱毒疫苗株S19的检测方法

权利要求书

1.一种用于鉴别牛种布氏菌弱毒疫苗株S19株的引物组，其特征在于，所述的引物组包含有两对引物；

其中第一引物对的上游引物的序列为SEQ ID NO:1；下游引物的序列为SEQ ID NO:2；

第二引物对的上游引物的序列为SEQ ID NO:3；下游引物的序列为SEQ ID NO:4。

2.权利要求1所述的引物组在制备检测牛种布氏菌弱毒疫苗株S19株的制品中的应用。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的制品为检测试剂盒。

4.一种检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中包含有权利要求1所述的引物组。

5.权利要求4所述的试剂盒在检测牛种布氏菌弱毒疫苗株S19株中的应用。

6.一种检测牛种布氏菌弱毒疫苗株S19株的方法，其特征在于，所述的方法包括如下步骤：

1)待检测基因组DNA的提取：

用细菌基因组DNA提取试剂盒提取待检测样品的细菌DNA；

2)RPA步骤：

将权利要求1所述的引物组及各反应组分，分别加入反应体系中，39℃反应30min；

3)结果检测：回收纯化RPA反应产物，2％琼脂糖凝胶电泳检测，判定检测结果。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的方法中判定检测结果，如果第一引物对的扩增产物为阳性，而第二引物对的扩增产物为阴性；则待检测菌株为牛种布氏菌弱毒疫苗株S19株；如果第一引物对的扩增产物为阳性，第二引物对的扩增产物为阳性，则待检测菌株为非牛种布氏菌弱毒疫苗株S19的其它布氏菌菌株。

8.一种判定牛种布氏菌的检测标准，其特征在于，所述的标准，是对于待检测的布氏菌菌株，其权利要求1所述的第一引物对的扩增产物为阳性，而第二引物对的扩增产物为阴性；则待检测菌株为牛种布氏菌弱毒疫苗株S19株；如果第一引物对的扩增产物为阳性，第二引物对的扩增产物为阳性，则待检测菌株为非牛种布氏菌弱毒疫苗株S19株的其它布氏菌菌株。