[发明专利]一种提取基因组DNA的试剂盒

说明书

本发明提供了一种提取基因组DNA的试剂盒，试剂1、试剂2和试剂3。本发明所述试剂盒增强了所提取基因组DNA的纯度和完整性，提高产物得率，所用试剂无毒无害，保证操作人员的健康，减少环境的污染。可提取微量样本中的基因组DNA，实现了被检测的物体的无损伤取样，且提取效率高。

技术领域

本发明涉及分子生物学的生物样品提取领域，尤其涉及一种提取基因组DNA的试剂盒和提取方法。

背景技术

目前常采用CTAB法、PTB法、QIAGEN试剂盒法、高盐低pH法等方法提取基因组DNA。CTAB法采用CTAB(hexadecyltrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵)，它是一种阳离子去污剂，在高离子强度的溶液中，CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物，产生沉淀，但却不能与核酸形成复合物产生沉淀。通过离心获得含有核酸的上清液，通过加入氯仿等有机试剂进行抽提，去除蛋白、多糖、酚类等杂质后，加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。CTAB法需要用到β-巯基乙醇、氯仿、酚等试剂。但酚和氯仿的使用会对人体有一定的危害，并污染环境。且提取大概需要花费2-3天时间。PTB法需要使用EDTA、蛋白酶K、PTB、酚、氯仿等试剂，其操作步骤异常繁琐，操作时间需5-7天，操作过程中会使用到酚、氯仿多种有害物质。高盐低pH法：需要使用EDTA、NaCl、醋酸钠、十二烷基硫酸钠(SDS)、氯仿、醋酸钾等试剂。操作步骤与CTAB法类似，但是提取的DNA得率较低且杂质较多。试剂盒法：使用方便但是提取的得率较低，在样品本身DNA含量低的情况下具有明显的局限性，并且成本较高。以上这些提取方法和方法本身的不足在很多文献中有报道。

在人们的生产、生活中，木材的保护和合理利用成为人们所关注的焦点。随着时代发展和人们生活水平的不断提高，木制材料在生活中的应用越来越受到人们的青睐，特别是一些高档名贵木材制品也跻身于奢侈品行列，成为人们追求生活品质的象征。正是由于这些珍惜名贵木材与普通木材在价格上存在巨大的差额，导致一些不法分子将一些容易混淆和不易区分的树种和木材制品当做名贵珍惜树种和木材制品进行销售，极大地扰乱了红木市场、仿古木市场、古典家具市场和名贵乐器市场的正常秩序，在经济上和精神上给消费者带来了巨大的损失和打击。而一些禁止砍伐的珍贵树种也被乔装成普通木材进行运输和走私，这无疑给林业检查和海关人员的识别工作增加了难度。因此，在木材加工、利用、使用和贸易活动中，对木材进行科学、快速、准确地识别和鉴定就显得尤为重要和迫切。

传统的木材识别方法要求鉴定者有丰富的植物学知识和木材构造方面的专业知识。通常以传统的木材鉴定手段，解剖切片观察木材的构造以及形态特征从而得出判定结果。由于鉴定者对具体形态特征的主观感受不一样，有时候即使是专业的人员得出的鉴定结果也不完全一致，尤其是形态特征比较相似的木材品种。随着分子生物学技术的发展，基因组DNA分析也被运用到鉴定木材的方法中。而运用基因组DNA分析技术识别和鉴定木材的前提是从木材组织中提取到足够数量和高质量的DNA，以满足后续的PCR扩增、基因测序等分子生物学鉴定方法。