[发明专利]一种提取基因组DNA的试剂盒有效
申请号: | 201711388508.3 | 申请日: | 2015-02-11 |
公开(公告)号: | CN108048449B | 公开(公告)日: | 2021-10-08 |
发明(设计)人: | 林源吉;丁佳女;叶俊波;洪巧娟 | 申请(专利权)人: | 杭州百迈生物股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 311228 浙江省杭州市大江东产*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提取 基因组 dna 试剂盒 | ||
1.提取基因组DNA的试剂盒在提取植物基因组DNA的应用,所述试剂盒包括试剂1、试剂2和试剂3,其中所述试剂1包括以下组分:0.1%-5%的十六烷基三甲基溴化铵(质量百分比)、10mM-200mM的Tris、10mM-200mM的EDTA、0.1%-10%的PVP(质量百分比)、0.1M-5M的NaCl、溶剂为去离子水;试剂2包括以下组分:0.1M-6.5M的盐酸胍、1%-50%的乙醇(体积百分比)、0.1M-2M的柠檬酸钠、溶剂为去离子水;试剂3包括以下组分:0.1M-8M的盐酸胍、0.05M-0.2M的甘氨酸、溶剂为去离子水,其特征在于,在沉淀非DNA的杂质步骤中,在裂解的样品细胞中加入试剂2,混匀后冰浴。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,还包括洗涤液和/或洗脱液。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述的洗涤液包括去蛋白洗涤液和去盐洗涤液。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述去蛋白洗涤液包括1M-6M的盐酸胍,1mM-50mM的EDTA·2Na·2H2O,溶剂为去离子水;所述去盐洗涤液包括20mM-200mM的NaAC·3H2O,溶剂为去离子水;洗脱液为去离子水。
5.根据权利要求1至4之一所述的应用,其特征在于,试剂1的pH值为4.5-8.5,试剂2的pH值为3.3-7.5,试剂3的pH值为2.5-8.0。
6.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的试剂1包括以下组分:3.5%的十六烷基三甲基溴化铵、120mM的Tris、110mM的EDTA、6%的PVP、3M的NaCl、溶剂为去离子水;试剂2包括以下组分:2.5M的盐酸胍、25%的乙醇、1M的柠檬酸钠、溶剂为去离子水;试剂3包括以下组分:4M的盐酸胍、0.1M的甘氨酸、溶剂为去离子水。
7.根据权利要求1至4之一所述的应用,其特征在于,所述植物选自黄檀类木材、酸枝类木材、花梨类木材、楠木、黄金檀、印尼菠萝格、大叶紫檀。
8.根据权利要求1至4之一所述的应用,其特征在于,冰浴时间为10min。
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