[发明专利]解淀粉芽孢杆菌Y-3生物保鲜剂的制备方法及其使用方法

权利要求书

1.一株解淀粉芽孢杆菌新菌株Y-3，于2017年5月11日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通为生物中心进行专利保藏，登记入册编号CGMCC NO为：14113；解淀粉芽孢杆菌Y-3在离体平板上对番茄灰霉病菌和番茄早疫病菌的抑菌效果可达97.47％和88.48％，其抑菌活性同目前报道的相关菌株相比具有明显的活性优势；在番茄活体上对番茄灰霉病菌和番茄早疫病菌的抑菌率达94.86％和64.01％，其中对采后番茄灰霉病原抑菌活性同离体相比下降不明显，在番茄采后灰霉病害防治中优势明显。

2.一种解淀粉芽孢杆菌Y-3生物保鲜剂的制备方法，其特征在于：该制备方法的步骤是：

S1、从梓树叶片分离出解淀粉芽孢杆菌Y-3，于-80℃的环境下保存；

S2、拮抗细菌活化：取-80℃保存的解淀粉芽孢杆菌Y-320μL采用涂布法涂布于新鲜NA平板，并于26℃恒温活化培养24h后用于后续试验；

S3、采用接种环取活化后的解淀粉芽孢杆菌Y-31环，接种至新鲜NB发酵液中，于160r/min、28℃发酵培养5d，使其抗逆性芽孢率达90％以上后终止发酵，用于可湿性粉剂制备；

S4、将膨润土经粉碎机粉碎使其细度小于或等于44μm，装于250mL磨口广口瓶后于高温高压灭菌锅灭菌30min，并置于50℃烘箱中烘干备用；

S5、将接种解淀粉芽孢杆菌Y-3培养的NB发酵液、膨润土、PEG8000、净洗剂、羧甲基纤维素钠混合，经45℃真空干燥后，于粉碎机中粉碎使其细度小于或等于44μm，制得生物保鲜可湿性粉剂；接种解淀粉芽孢杆菌Y-3培养的NB发酵液、膨润土、PEG8000、净洗剂、羧甲基纤维素钠的质量比为70：10：2.4：3.6：2。

3.根据权利要求2所述的解淀粉芽孢杆菌Y-3生物保鲜剂的制备方法，其特征在于：所述NA平板由牛肉浸膏、蛋白胨，氯化钠、琼脂与蒸馏水搅拌后制备而成，所述牛肉浸膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、蒸馏水的质量比为3：10：5：18：1000，该NA平板的pH值为7.0。

4.根据权利要求3所述的解淀粉芽孢杆菌Y-3生物保鲜剂的制备方法，其特征在于：NB发酵液由牛肉浸膏、蛋白胨、氯化钠、蒸馏水制备而成，所述牛肉浸膏、蛋白胨、氯化钠、蒸馏水的质量比为3：10：5：1000，该NB发酵液的pH值为7.0。

5.一种如权利要求2至4所述制备方法所制得的解淀粉芽孢杆菌Y-3生物保鲜剂的使用方法，其特征在于：该使用方法的步骤是：

S6、将淀粉芽孢杆菌Y-3生物保鲜剂加水稀释至300倍，

S7、在20℃自然贮藏条件下，采用喷雾或浸泡方式对采后的番茄进行处理。

6.根据权利要求5所述的解淀粉芽孢杆菌Y-3生物保鲜剂的的使用方法，其特征在于：所述浸泡时间为20min。