[发明专利]一种可工业化生产的从尿液中制备人表皮生长因子的方法在审
| 申请号： | 201711379515.7 | 申请日： | 2017-12-19 |
| 公开（公告）号： | CN107987150A | 公开（公告）日： | 2018-05-04 |
| 发明（设计）人： | 居维艳;厉道娟;傅和亮;李文全;袁玉;池正昌 | 申请（专利权）人： | 江苏艾迪药业有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/485 | 分类号： | C07K14/485;C07K1/22;C07K1/20;C07K1/18;C07K1/16 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙)32204 | 代理人： | 柏尚春 |
| 地址： | 225008 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 工业化 生产 尿液 制备 表皮 生长因子 方法 | ||
1.一种可工业化生产的从尿液中制备人表皮生长因子的方法，其特征在于，包括将从人尿中提取的尿蛋白浓缩液依次经金属螯合亲和层析柱、染料亲和层析柱、疏水层析柱、阴离子交换柱、凝胶过滤层析柱层析，得到人表皮生长因子。
2.根据权利要求1所述的可工业化生产的从尿液中制备人表皮生长因子的方法，其特征在于，所述的尿蛋白浓缩液由以下步骤制备得到：利用阴离子交换树脂作为吸附剂吸附尿液中的尿蛋白，清洗、解吸附、洗脱，将洗脱液进行超滤浓缩，即得尿蛋白浓缩液。
3.根据权利要求2所述的可工业化生产的从尿液中制备人表皮生长因子的方法，其特征在于，所述的解吸附为利用0.5～1.5mol/L的NaCl水溶液进行尿蛋白的解吸附。
4.根据权利要求1所述的可工业化生产的从尿液中制备人表皮生长因子的方法，其特征在于，所述的金属鳌合亲和层析柱的鳌合金属离子是Cu2+、Zn2+、Ni2+、Fe3+中的任意一种，其层析时所用的平衡液为0.02～0.2mol/L的醋酸盐或磷酸盐缓冲液，所述缓冲液含0.2～2.0mol/L NaCl；冲洗液为0.02～0.2mol/L甘氨酸水溶液，pH为2.5～4.0；洗脱液为0.02-0.2mol/L甘氨酸水溶液，所述水溶液含0.05-0.2mol/L NH4Cl，pH为2.5-4.0。
5.根据权利要求1所述的可工业化生产的从尿液中制备人表皮生长因子的方法，其特征在于，所述的染料亲和层析柱采用的染料为Red染料、Blue染料中的任意一种，其层析时所用的平衡液为0.02～0.2mol/L的醋酸盐或磷酸盐缓冲液，pH为4.0～6.0；冲洗液为0.02～0.2mol/L的醋酸盐或磷酸盐缓冲液，所述缓冲液含0.1～0.5mol/L NaCl，pH为4.0～6.0；洗脱液为0.02～0.2mol/L的醋酸盐或磷酸盐缓冲液，pH为5.0～8.0。
6.根据权利要求1所述的可工业化生产的从尿液中制备人表皮生长因子的方法，其特征在于，所述的疏水层析柱的疏水介质为Phenyl-琼脂糖凝胶，其层析时所用的平衡液为0.02～0.2mol/L的醋酸盐缓冲液，所述缓冲液含0.5～2.0mol/L(NH4)2SO4，pH为4.0～8.0；冲洗液为0.5～1.0mol/L(NH4)2SO4水溶液，pH为5.0～8.0；洗脱液为0.2～0.5mol/L(NH4)2SO4水溶液，pH为5.0～8.0。
7.根据权利要求1所述的可工业化生产的从尿液中制备人表皮生长因子的方法，其特征在于，疏水层析柱层析和阴离子交换柱层析之间还包括去病毒步骤。
8.根据权利要求1所述的可工业化生产的从尿液中制备人表皮生长因子的方法，其特征在于，所述的阴离子交换柱层析时所用的平衡液为0.02～0.1mol/L Tris缓冲液，所述缓冲液含0.02～0.1mol/L NaCl，pH为7.0～9.0；洗脱液为0.02～0.1mol/L Tris缓冲液，所述缓冲液含0.1～0.5mol/L NaCl，pH为7.0～9.0。
9.根据权利要求1所述的可工业化生产的从尿液中制备人表皮生长因子的方法，其特征在于，所述的凝胶过滤层析柱层析时所用的冲洗液为0.02-0.05mol/L的磷酸盐缓冲液或醋酸盐缓冲液，pH为4.0-8.0。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于江苏艾迪药业有限公司，未经江苏艾迪药业有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201711379515.7/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
