[发明专利]一种乙酰氨基葡萄糖偶联物的制备方法及应用

权利要求书

1.一种式I所示乙酰氨基葡萄糖偶联物，其特征在于，糖基间以beta-1，4糖苷键连接，其中乙酰氨基葡萄糖数量n为大于1或等于1的整数，R为载体物质，与其中一个糖基的2号位NH2以肽键连接。

2.一种乙酰氨基葡萄糖偶联物的制备方法，其特征在于，式I中的游离-NH2与载体物质中的-COOH的脱水缩合反应形成偶联物，包括以下步骤：

1)与生物素反应

①取生物素、二环己基碳二亚胺(DCC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)溶于DMF中，搅拌反应，离心收集上清液；

②取式I乙酰氨基葡萄糖溶于缓冲液中；

③将①中溶液搅拌下逐滴加入到②所得溶液中，搅拌反应；

④缓冲液透析，得到偶联物。

2)与蛋白质、蛋白质片段、合成多肽或半合成多肽反应

取蛋白质或多肽、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)和式I乙酰氨基葡萄糖溶于DMF中，搅拌反应；缓冲液透析，得到偶联物。

3.权利要求2所述的载体物质，为含有-COOH的有机物，包括但不限于生物素、蛋白质、蛋白质片段、合成多肽或半合成多肽。

4.权利要求3所述的蛋白质，其特征在于，包括但不限于亲和素(SA)、牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)、铜蓝蛋白(KLH)、牛甲状腺球蛋白(BTG)。

5.一种乙酰氨基葡萄糖抗原的应用，其特征在于，用权利要求4所述乙酰氨基葡萄糖抗原免疫动物，获得抗乙酰氨基葡萄糖抗体。

6.一种抗乙酰氨基葡萄糖抗体检测方法，该抗体来自粪便和/或体液，通过与权利要求1～4所述的乙酰氨基葡萄糖偶联物的免疫反应来进行，其中在免疫反应中使用所述乙酰氨基葡萄糖偶联物与固相载体结合，检测所述抗乙酰氨基葡萄糖抗体。

7.权利要求6所述的固相载体，其特征在于，包括但不限于荧光微球、树脂微球、磁性微球、胶体金颗粒、微孔板、薄膜、微孔膜、硝酸纤维素膜。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述体液为血液。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述体液为血清。