[发明专利]一种鉴定草甘膦抗性水稻的方法有效
申请号: | 201711372315.9 | 申请日: | 2017-12-19 |
公开(公告)号: | CN109929941B | 公开(公告)日: | 2022-09-16 |
发明(设计)人: | 王旭静;王志兴;董玉凤 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院生物技术研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;何叶喧 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鉴定 草甘膦 抗性 水稻 方法 | ||
1.引物组合的应用,为如下(c1)或(c2)或(c3)或(c4):
(c1)制备用于鉴定转基因水稻En-12和转基因水稻Ec-8为亲本的后代中的草甘膦抗性植株的试剂盒;
(c2)鉴定转基因水稻En-12和转基因水稻Ec-8为亲本的后代中的草甘膦抗性植株;
(c3)制备用于筛选转基因水稻En-12和转基因水稻Ec-8为亲本的后代中的草甘膦抗性植株的试剂盒;
(c4)筛选转基因水稻En-12和转基因水稻Ec-8为亲本的后代中的草甘膦抗性植株;
所述引物组合由引物对甲和引物对乙组成;
所述引物对甲由引物En-F和引物En-R组成,所述引物En-F为序列表的序列3所示的单链DNA分子,所述引物En-R为序列表的序列4所示的单链DNA分子;
所述引物对乙由引物Ec-F和引物Ec-R组成;所述引物Ec-F为序列表的序列5所示的单链DNA分子;所述引物Ec-R为序列表的序列6所示的单链DNA分子。
2.一种鉴定转基因水稻En-12和转基因水稻Ec-8为亲本的后代中的草甘膦抗性植株的方法,包括如下步骤:以转基因水稻En-12和转基因水稻Ec-8为亲本的后代植株的基因组DNA为模板,分别采用引物对甲和引物对乙进行PCR扩增,如果满足特定标准,该后代植株为草甘膦抗性植株;如果不满足所述特定标准,该后代植株为草甘膦感性植株;所述特定标准为:采用引物对甲可以得到521bp的扩增产物且采用引物对乙可以得到550bp的扩增产物;
所述引物对甲由引物En-F和引物En-R组成,所述引物En-F为序列表的序列3所示的单链DNA分子,所述引物En-R为序列表的序列4所示的单链DNA分子;
所述引物对乙由引物Ec-F和引物Ec-R组成;所述引物Ec-F为序列表的序列5所示的单链DNA分子;所述引物Ec-R为序列表的序列6所示的单链DNA分子。
3.一种筛选转基因水稻En-12和转基因水稻Ec-8为亲本的后代中的草甘膦抗性植株的方法,包括如下步骤:以转基因水稻En-12和转基因水稻Ec-8为亲本的后代植株的基因组DNA为模板,分别采用引物对甲和引物对乙进行PCR扩增,如果采用引物对甲可以得到521bp的扩增产物且采用引物对乙可以得到550bp的扩增产物,该后代植株即为筛选出来的草甘膦抗性植株;
所述引物对甲由引物En-F和引物En-R组成,所述引物En-F为序列表的序列3所示的单链DNA分子,所述引物En-R为序列表的序列4所示的单链DNA分子;
所述引物对乙由引物Ec-F和引物Ec-R组成;所述引物Ec-F为序列表的序列5所示的单链DNA分子;所述引物Ec-R为序列表的序列6所示的单链DNA分子。
4.一种鉴定转基因水稻En-12和转基因水稻Ec-8为亲本的后代中的草甘膦抗性植株的方法:检测转基因水稻En-12和转基因水稻Ec-8为亲本的后代植株的基因组DNA中是否具有片段甲和片段乙;如果满足特定标准,该后代植株为草甘膦抗性植株;如果不满足所述特定标准,该后代植株为草甘膦感性植株;
所述特定标准为:基因组DNA中同时具有片段甲和片段乙;
所述片段甲为如下(e1)或(e2):
(e1)序列表的序列1第364-884位核苷酸所示的DNA分子;
(e2)序列表的序列1所示的DNA分子;
所述片段乙为如下(f1)或(f2):
(f1)序列表的序列2第141-690位核苷酸所示的DNA分子;
(f2)序列表的序列2所示的DNA分子。
5.一种筛选转基因水稻En-12和转基因水稻Ec-8为亲本的后代中的草甘膦抗性植株的方法,包括如下步骤:检测转基因水稻En-12和转基因水稻Ec-8为亲本的后代植株的基因组DNA中是否具有片段甲和片段乙;如果基因组DNA中同时具有片段甲和片段乙,该后代植株即为筛选出来的草甘膦抗性水稻;
所述片段甲为如下(e1)或(e2):
(e1)序列表的序列1第364-884位核苷酸所示的DNA分子;
(e2)序列表的序列1所示的DNA分子;
所述片段乙为如下(f1)或(f2):
(f1)序列表的序列2第141-690位核苷酸所示的DNA分子;
(f2)序列表的序列2所示的DNA分子。
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