[发明专利]一种花生粕中黄曲霉毒素降解及同步制备花生蛋白肽的方法

说明书

本发明公开了一种花生粕中黄曲霉毒素降解及同步制备花生蛋白肽的方法，属于花生食品安全与营养领域。本发明花生粕中黄曲霉毒素降解及同步制备花生蛋白肽的方法包括原料处理、微生物分段发酵、酶解、灭酶离心和喷雾干燥；微生物分段发酵所用微生物为：云芝菌、枯草芽孢杆菌和黑曲霉。本发明采用三种菌协同分段发酵，分段酶解，在降解黄曲霉毒素的同时，还能降解环匹阿尼酸，并制备出抗氧化活性好、营养价值高的花生蛋白肽，减少操作流程、缩短了工艺时间，节约成本，操作方法简单，易于工业化生产。

技术领域

本发明属于花生食品安全与营养领域，具体涉及一种花生粕中黄曲霉毒素降解及同步制备花生蛋白肽的方法。

背景技术

我国是花生生产大国，每年花生榨油后可得到约300万吨的花生粕。花生粕中含有丰富的营养成分，如花生蛋白、黄酮类、糖类等。其中花生蛋白与应用较广的大豆蛋白相比，具有含肠胃胀气因子和抗营养因子较少的优点；与菜籽、棉籽蛋白相比，具有所含毒性物质较少的优点。但花生粕利用率低，主要作为饲料，价格低廉，现在约2600元/吨，远低于大豆粕的价格(3200元/吨)。限制价格和广泛应用的主要因素是其易感染黄曲菌产生黄曲霉毒素。

黄曲霉毒素具有强毒性和致癌性，严重危害人畜健康，仅0.294mg/kg剂量就能引起敏感动物的急性中毒死亡。黄曲霉毒素性质稳定，一般加工方法不能去除其毒性。多年来，科学家们致力于利用物理、化学、生物等多种方法来去除黄曲霉毒素。传统的物理和化学的黄曲霉毒素去毒方法包括臭氧、氨化法、碱法、射线辐照法、吸附法和超滤-渗滤法等，这些方法都存在一些问题，如导致食品和饲料中的营养损失，影响感官品质，有些方法所需要的设备价格昂贵等等；其次有些方法的反应机制是可逆的，黄曲霉毒素的毒性会重新出现，这些都限制了传统理化方法在实际生产中的应用。

生物法，是利用微生物及其分泌的酶等代谢产物降解黄曲霉毒素的方法，具有效率高、特异性强以及对食品、饲料和环境没有污染的特点。国内外生物降解脱除黄曲霉毒素的研究主要集中在微生物菌株直接作用于黄曲霉毒素，以及把菌株产生的酶做成制剂作用于黄曲霉毒素。而对于复杂基质如花生粕中黄曲霉毒素的降解研究较少。

生物降解所涉及的菌种目前主要涉及国内的假蜜环菌、粘细菌、嗜麦芽窄食单胞菌以及国外研究的橙色黄杆菌和红串红球菌等，但存在着菌株在花生粕中不易生长繁殖、降解率低、有些菌株不能在食品生产中应用，有一定的安全隐患等问题。且都是研究单株菌对黄曲霉毒素的降解作用，未报道多菌联合对黄曲霉毒素的降解作用。

同时花生粕中含有大量的蛋白和纤维，对花生粕中蛋白肽的制备报到较多，但对于蛋白中的黄曲霉毒素未见有去除的报到，导致制备的蛋白肽中存在黄曲霉毒素，影响消费者的健康。

发明内容

为了高效利用花生粕中的蛋白质、安全降解花生粕中的黄曲霉毒素，提高花生粕的营养和利用价值，消除黄曲霉毒素对花生粕利用的危害，本发明提供了一种花生粕中黄曲霉毒素降解及同步制备花生蛋白肽的方法，利用云芝、枯草芽孢杆菌、黑曲霉三种菌种分段发酵花生粕产生黄曲霉毒素降解酶、蛋白水解酶以及纤维素酶等，利用产生的生物酶对花生粕中黄曲霉毒素进行降解，同时对花生粕中的蛋白和纤维进行酶解，在降解黄曲霉毒素的同时，制备花生蛋白肽。

为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案如下：

一种花生粕中黄曲霉毒素降解及同步制备花生蛋白肽的方法，步骤如下：

(1)原料处理：将花生粕粉碎，过40目筛；向花生粕粉中加入2～3倍重量的蒸馏水，灭菌；

(2)微生物分段接种发酵：向灭菌的花生粕中接种活化后的云芝菌种，25-40℃固体发酵5-8d，再向发酵的花生粕中接种活化过的枯草芽孢杆菌，30-35℃固体发酵3-5d，再向花生粕中接种活化过的黑曲霉，28-35℃固体发酵3-5d；

(4)酶解：发酵后的培养基加入蒸馏水，33-35℃震荡酶解1-2h后，22-25℃震荡酶解8-12h；