[发明专利]一种与(1,3)-β-D-葡聚糖特异性结合的核酸适配体及其应用有效
申请号: | 201711364163.8 | 申请日: | 2017-12-18 |
公开(公告)号: | CN108467866B | 公开(公告)日: | 2021-08-24 |
发明(设计)人: | 林勇平;杨敏;陈源;刘忠民 | 申请(专利权)人: | 广州医科大学附属第一医院 |
主分类号: | C12N15/115 | 分类号: | C12N15/115;G01N33/569 |
代理公司: | 广东深宏盾律师事务所 44364 | 代理人: | 赵琼花 |
地址: | 510120 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 聚糖 特异性 结合 核酸 适配体 及其 应用 | ||
1.一种与(1,3)-β-D-葡聚糖特异性结合的核酸适配体,其特征在于,所述核酸适配体的DNA序列如SEQ ID NO.1。
2.如权利要求1所述的与(1,3)-β-D-葡聚糖特异性结合的核酸适配体在制备(1,3)-β-D-葡聚糖的定性、定量检测试剂中的应用。
3.如权利要求1所述的核酸适配体在制备对侵袭性真菌感染的辅助诊断试剂中的应用。
4.一种对(1,3)-β-D-葡聚糖进行检测的方法,所述方法用于非疾病类的检测,包含以下步骤:
⑴将权利要求1所述的与(1,3)-β-D-葡聚糖特异性结合的核酸适配体经过生物素和荧光标记并与过量含有淬灭基团标记的DNA孵育,所述核酸适配体与该含有淬灭基团标记的DNA链部分互补;
⑵将其与预处理的链霉亲和素磁珠孵育;
⑶清洗除去过量DNA;
⑷将含有(1,3)-β-D-葡聚糖的样品加入上述体系孵育;
⑸对检测样品荧光强度进行分析。
5.如权利要求4所述的对(1,3)-β-D-葡聚糖进行检测的方法,其特征在于所述的含有淬灭基团标记的DNA为5′-CATTGGGCTTGG-BHQ1。
6.如权利要求4所述的对(1,3)-β-D-葡聚糖进行检测的方法,其特征在于所述与(1,3)-β-D-葡聚糖特异性结合的核酸适配体经过生物素和荧光标记形成如下结构:5′-FAM-TCCAAGC-[权利要求1所述的与(1,3)-β-D-葡聚糖特异性结合的核酸适配体DNA序列]-TTTTTT-Biotin。
7.如权利要求5所述的对(1,3)-β-D-葡聚糖进行检测的方法,其特征在于所述与(1,3)-β-D-葡聚糖特异性结合的核酸适配体经过生物素和荧光标记形成如下结构:5′-FAM-TCCAAGC-[权利要求1所述的与(1,3)-β-D-葡聚糖特异性结合的核酸适配体DNA序列]-TTTTTT-Biotin。
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