[发明专利]一种组织工程角膜

权利要求书

1.一种组织工程角膜，其特征在于：包括至少三羊膜组织层，相邻的二羊膜组织层间生长有角膜基质细胞，并含有由上述角膜基质细胞分泌的包含角蛋白聚糖、光蛋白聚糖、I型胶原蛋白和V型胶原蛋白的细胞外基质，且上述细胞外基质排列规则，形成类似于角膜基质的组织结构。在此结构上表面和下表面分别接种角膜上皮细胞和角膜内皮细胞形成全角膜。上述羊膜组织层的表面的胶原纤维排列规则，纤维之间相互平行，具有沟槽结构，并以正相交紧密排列成纤维薄片，以引导角膜基质细胞及其分泌的细胞外基质规则排列，上述至少三羊膜组织层具有抑制纤维化的特性以保持角膜基质细胞的特性并抑制角膜基质细胞向成纤维细胞分化。

2.如权利要求1所述的一种组织工程角膜，其特征在于：所述角膜基质细胞由接种于所述至少三羊膜组织层之间的干细胞分化而成，该干细胞包括角膜基质干细胞、间充质干细胞、神经嵴来源的干细胞和胚胎干细胞。

3.如权利要求1所述的一种组织工程角膜，其特征在于：所述羊膜组织层为全层羊膜或经蛋白酶消化处理去除海绵层及网状层后保留的致密层。

4.如权利要求1所述的一种组织工程角膜，其特征在于：所述至少三羊膜组织层的最上层的羊膜组织层的上表面接种并生长有角膜上皮细胞。

5.如权利要求4所述的一种组织工程角膜，其特征在于：所述角膜上皮细胞来源于原代培养的角膜上皮细胞、传代培养的角膜上皮细胞、角膜上皮细胞系或干细胞分化而来的角膜上皮替代细胞。

6.如权利要求1所述的一种组织工程角膜，其特征在于：所述至少三羊膜组织层的最下层的羊膜组织层的下表面接种并生长有角膜内皮细胞。

7.如权利要求6所述的一种组织工程角膜，其特征在于：所述角膜内皮细胞来源于原代培养的角膜内皮细胞、传代培养的角膜内皮细胞、角膜内皮细胞系或干细胞分化而来的角膜内皮替代细胞。

8.如权利要求1所述的一种组织工程角膜，其特征在于：其培养环境的氧含量为5％～15％。

9.如权利要求1所述的一种组织工程角膜，其特征在于：其所用的培养基为包括非必需氨基酸、成纤维细胞生长因子2和转化生长因子β3的有血清培养基或无血清培养基。