[发明专利]氨解方法及氨解组合物

权利要求书

1.一种用于在DNA固相合成后进行氨解的方法，包括以下步骤：

1)向包括用于合成DNA片段的固相载体的合成柱内加入氨解组合物；

2)将所述合成柱置于装有氨解缓冲液的可密封容器内，并保持所述合成柱位于所述氨解缓冲液的液面上方；以及

3)以微波处理所述可密封容器，使得所述固相载体处于所述氨解缓冲液的蒸汽气氛中；

4)取出所述合成柱，以洗脱液处理所述固相载体并收集流出液；

其中所述氨解组合物为1:2-20:5-40体积比的二亚乙基三胺、1M碱性水溶液和醇的混合溶液，所述碱性水溶液选自氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铍、氢氧化镁、氢氧化钙溶液及其组合，且所述醇选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、仲丁醇、叔丁醇及其组合；

其中所述氨解缓冲液为1:5-80体积比的醇和水的混合溶液。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述固相载体为CPG粉末或CPG Frits。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述合成柱为一个或更多个。

4.如权利要求1所述的方法，其中，以体积计，步骤1)中所述氨解组合物的用量为所述固相载体体积的0.3至5倍。

5.如权利要求1所述的方法，其中步骤3)中所述微波处理包括以700W微波处理5至20分钟。

6.如权利要求1所述的方法，其中步骤4)中在所述洗脱液处理之前还包括以清洗试剂清洗所述合成柱一次或更多次。

7.如权利要求6所述的方法，其中所述清洗试剂为甲醇水溶液或乙腈。

8.如权利要求1所述的方法，其中所述氨解组合物为1:3:6体积比的二亚乙基三胺、1M氢氧化锂水溶液和乙醇的混合溶液。

9.如权利要求1所述的方法，其中所述DNA片段长度为10-200个碱基。

10.一种氨解组合物，所述氨解组合物为1:2-20:5-40体积比的二亚乙基三胺、1M碱性水溶液和醇的混合溶液，所述碱性水溶液选自氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铍、氢氧化镁、氢氧化钙溶液及其组合，且所述醇选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、仲丁醇、叔丁醇及其组合。

11.根据权利要求10所述的氨解组合物，所述氨解组合物为1:3:6体积比的二乙基三胺、1M氢氧化锂水溶液和乙醇的混合溶液。