[发明专利]茶叶中香精高通量筛查检测方法、茶叶中香精快速筛查数据库以及茶叶中香气成分数据库

说明书

本发明通过GC×GC‑TOF/MS技术建立茶叶中香精的高通量筛查检测方法，并建立茶叶中香精快速筛查数据库以及茶叶中香气成分数据库，无需标准品就可对茶叶中添加的香精进行快速筛查鉴定，辅助GC‑MS及GC‑TOF/MS进行定性，并提高筛查结果的可信度。

技术领域

本发明属于色谱分离分析技术领域，具体涉及一种茶叶中香精高通量筛查检测方法、茶叶中香精快速筛查数据库以及茶叶中香气成分数据库。

背景技术

茶叶是中国传统饮品，具有独特的风味与保健功能。茶叶富含儿茶素类化合物、维生素及人体必需微量元素，具有抗氧化、抗癌、降血脂、血压、血糖、杀菌消炎、保护心血管及减肥等功效。受到国内外广大消费者的喜爱。近年来有相关文献及新闻报道，有不法商家为追求更大的商业利润，在利益的驱使下违规往茶叶中添加香精，增加茶叶香气，以降低成本，提高茶叶商品价值。这种做法降低了茶叶产品质量、增加了茶叶的安全隐患并损害了消费者的利益。目前国内外对茶叶中非法添加香精的检测较少，也没有相应的质检行业标准或国家标准出台，而香精成分复杂，存在结构类似的同分异构体或同系物，其质谱图也十分相似，仅靠谱库检索难以得到准确和可靠的鉴定。

目前，分析挥发性化合物主要是使用气相色谱结合质谱进行分析检测，但由于茶叶基质复杂、茶叶中可能添加的香精种类繁多，而气相色谱分离能力有限，导致有较多峰重叠，快速筛查能力有限。全二维气相色谱与气相色谱比较，有着高峰容量、分辨率及灵敏度的优点，能弥补气相色谱的不足，与具有高灵敏度的飞行时间质谱联用，更适合用于复杂组分的筛查鉴定。目前国内运用全二维气相色谱-飞行时间质谱(GC×GC-TOF/MS)对茶叶香精进行高通量筛查的方法较少，茶叶香精的筛查数据库也是空白。国内茶叶香精快速筛查数据库的缺失给筛查鉴定工作造成了不便。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明旨在利用GC×GC-TOF/MS技术建立茶叶中香精的高通量筛查检测方法，并建立茶叶中香精快速筛查数据库以及茶叶中香气成分数据库，无需标准品就可对茶叶中添加的香精进行快速筛查鉴定，辅助GC-MS 及GC-TOF/MS进行定性，并提高筛查结果的可信度。

本发明包括以下三方面的内容：

技术方案之一：茶叶中香精高通量筛查检测方法，包括以下步骤：

(1)对茶叶进行前处理，得到茶叶试样；

(2)将茶叶试样进行全二维气相色谱-飞行时间质谱检测分析，分析条件具体为：

GC×GC柱系统：一维柱为Agilent DB-5MS毛细管色谱柱，二维柱为Restek Rtx-200毛细管色谱柱；载气：He，纯度＞99.999％；载气流量：1.0mL/min；进样口温度：250℃；进样类型：不分流进样；进样体积：1.0μL；调制周期：5s；热吹时间：0.8s；冷吹时间：1.7s；一维柱程序升温：40℃保持0.2min后5℃ /min升至250℃保持5min；二维柱程序升温：45℃保持0.2min后5℃/min 升至255℃保持5min；

E1电离能量：-70eV；离子源温度：220℃；传输线温度：280℃；全离子扫描；采集质量数范围：m/z 40-500；采集电压：1800V；溶剂延迟：250s。

步骤(1)所述对茶叶进行前处理优选包括以下步骤：茶叶粉碎过420μm标准筛，称取茶叶粉末1.00g于5mL具塞离心管中，加入4mL正己烷-丙酮溶液提取，其中正己烷与丙酮的质量比例为3:1，常温下超声提取30min，3000r/min 离心5min，移取上层清液过0.22μm有机滤膜后进GC×GC-TOF/MS检测。

技术方案之二：茶叶中香精快速筛查数据库，其特征是，用GC×GC-TOF/MS 方法对香精标准品进行检测，得出137种香精的一维保留时间和二维保留时间，具体如说明书表1所示；所述GC×GC-TOF/MS分析条件具体同技术方案一。