[发明专利]重组蛋白质及其制造方法与应用有效
| 申请号: | 201711318494.8 | 申请日: | 2017-12-12 |
| 公开(公告)号: | CN108220263B | 公开(公告)日: | 2021-08-10 |
| 发明(设计)人: | 黄怡超;李怀洛;蔡郁吟;林志龙 | 申请(专利权)人: | 财团法人工业技术研究院 |
| 主分类号: | C12N9/06 | 分类号: | C12N9/06;C12N15/53;C12N15/63;C12Q1/26 |
| 代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 秦剑 |
| 地址: | 中国台*** | 国省代码: | 台湾;71 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 重组 蛋白质 及其 制造 方法 应用 | ||
1.一种重组蛋白质,其氨基酸序列为SEQ ID No:2的序列、SEQ ID No:3的序列以及SEQID No:4的序列中的一者。
2.一种重组蛋白质的制备方法,其特征在于,包括:
将质粒中编码SEQ ID No:1的氨基酸序列的核苷酸序列进行置换;
将进行置换后的所述质粒转化至宿主细胞中以得到转化体;以及
利用所述转化体表现出所述重组蛋白质;
其中所述置换为由下列置换所组成的群组中的一者:
将编码第182位的甘氨酸的核苷酸进行置换以得到如SEQ ID No:2所示氨基酸序列的所述重组蛋白质;
将编码所述第182位的甘氨酸的核苷酸及编码第268位的天门冬酰胺的核苷酸同时进行置换以得到如SEQ ID No:3所示氨基酸序列的所述重组蛋白质;以及
将编码所述第182位的甘氨酸的核苷酸、编码所述第268位的天门冬酰胺的核苷酸、以及编码所述第384位的组氨酸的核苷酸同时进行置换以得到如SEQ ID No:4所示氨基酸序列的所述重组蛋白质。
3.根据权利要求2所述的重组蛋白质的制备方法,其特征在于,对编码所述氨基酸的核苷酸进行置换的方法包括:
以如SEQ ID No:6所示引物与如SEQ ID No:7所示引物对编码所述第182位的甘氨酸的核苷酸进行置换;
以如SEQ ID No:8所示引物与如SEQ ID No:9所示引物对编码所述第268位的天门冬酰胺的核苷酸进行置换;以及
以如SEQ ID No:10所示引物与如SEQ ID No:11所示引物对编码所述第384位的组氨酸的核苷酸进行置换。
4.根据权利要求2所述的重组蛋白质的制备方法,其特征在于,所述质粒的制备方法包括:
优化果糖基氨基酸氧化酶基因的密码子,以获得如SEQ ID No:5所示的多核苷酸;以及
建构如所述SEQ ID No:5所示的多核苷酸至载体中,以获得编码所述SEQ ID No:1所示氨基酸序列的所述质粒。
5.一种编码根据权利要求1所述的重组蛋白质的多核苷酸。
6.一种用于检测糖化血红蛋白的检测试剂盒,其特征在于,包括根据权利要求1所述的重组蛋白质。
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