[发明专利]重组蛋白质及其制造方法与应用有效

专利信息
申请号: 201711318494.8 申请日: 2017-12-12
公开(公告)号: CN108220263B 公开(公告)日: 2021-08-10
发明(设计)人: 黄怡超;李怀洛;蔡郁吟;林志龙 申请(专利权)人: 财团法人工业技术研究院
主分类号: C12N9/06 分类号: C12N9/06;C12N15/53;C12N15/63;C12Q1/26
代理公司: 北京市柳沈律师事务所 11105 代理人: 秦剑
地址: 中国台*** 国省代码: 台湾;71
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摘要:
搜索关键词: 重组 蛋白质 及其 制造 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种重组蛋白质,其氨基酸序列为SEQ ID No:2的序列、SEQ ID No:3的序列以及SEQID No:4的序列中的一者。

2.一种重组蛋白质的制备方法,其特征在于,包括:

将质粒中编码SEQ ID No:1的氨基酸序列的核苷酸序列进行置换;

将进行置换后的所述质粒转化至宿主细胞中以得到转化体;以及

利用所述转化体表现出所述重组蛋白质;

其中所述置换为由下列置换所组成的群组中的一者:

将编码第182位的甘氨酸的核苷酸进行置换以得到如SEQ ID No:2所示氨基酸序列的所述重组蛋白质;

将编码所述第182位的甘氨酸的核苷酸及编码第268位的天门冬酰胺的核苷酸同时进行置换以得到如SEQ ID No:3所示氨基酸序列的所述重组蛋白质;以及

将编码所述第182位的甘氨酸的核苷酸、编码所述第268位的天门冬酰胺的核苷酸、以及编码所述第384位的组氨酸的核苷酸同时进行置换以得到如SEQ ID No:4所示氨基酸序列的所述重组蛋白质。

3.根据权利要求2所述的重组蛋白质的制备方法,其特征在于,对编码所述氨基酸的核苷酸进行置换的方法包括:

以如SEQ ID No:6所示引物与如SEQ ID No:7所示引物对编码所述第182位的甘氨酸的核苷酸进行置换;

以如SEQ ID No:8所示引物与如SEQ ID No:9所示引物对编码所述第268位的天门冬酰胺的核苷酸进行置换;以及

以如SEQ ID No:10所示引物与如SEQ ID No:11所示引物对编码所述第384位的组氨酸的核苷酸进行置换。

4.根据权利要求2所述的重组蛋白质的制备方法,其特征在于,所述质粒的制备方法包括:

优化果糖基氨基酸氧化酶基因的密码子,以获得如SEQ ID No:5所示的多核苷酸;以及

建构如所述SEQ ID No:5所示的多核苷酸至载体中,以获得编码所述SEQ ID No:1所示氨基酸序列的所述质粒。

5.一种编码根据权利要求1所述的重组蛋白质的多核苷酸。

6.一种用于检测糖化血红蛋白的检测试剂盒,其特征在于,包括根据权利要求1所述的重组蛋白质。

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