[发明专利]一种小麦赤霉病轻简化接种方法

说明书

本发明公开了一种小麦赤霉病轻简化接种方法，它包括下述步骤：(1)配制PDA培养基；(2)配置小麦赤霉病菌孢子悬浮液：(3)制备带菌牙签：(4)赤霉病菌的接种与套袋：以步骤(3)中制备的带菌牙签进行牙签接种、套袋；(6)观察、记录与统计：在接种后第21天时，调查统计标记小麦穗的总小穗数、发病小穗数，并计算出病小穗率。本发明中所公开的小麦赤霉病轻简化接种方法，该接种方法是用牙签接种的方法，简化了田间的接种步骤，轻简化了接种鉴定方法，提高了育种效率,为早期鉴定、筛选材料提供方法和标准。

技术领域

本发明涉及一种小麦赤霉病的接种方法，特别涉及一种小麦赤霉病轻简化 接种方法。

背景技术

小麦是我国主要粮食作物之一，我国小麦的种植面积大约占总粮食种植面 积的1/4，总产量仅次于水稻。因此，小麦生产对中国的粮食保障起着十分重要 的作用，影响着我国乃至全世界的农业和社会经济发展。小麦赤霉病(Fusarium Head Blight,FHB)是小麦生产中的重要病害之一，其严重程度仅次于条锈病， 国际玉米小麦改良中心(CIMMYT)将赤霉病确定为小麦产量中的一个主要限制 因素。小麦赤霉病菌侵入寄主后，不仅造成产量的损失，同时引起严重的毒素 污染，被毒素污染的麦粒对人畜都有较大的危害。

选育抗小麦赤霉病的小麦优良品种，是最有效、环保的防治小麦赤霉病的 方法。选育优良的抗赤霉病的小麦品种，需要对小麦进行抗性鉴定。因此，小 麦赤霉病的抗性鉴定技术一直是人们关注的问题，目前国内外报道的赤霉病抗 性评价方法主要有5种:

1)自然鉴定法。小麦在自然条件下发病，不进行人工接种，但是该方法鉴 定结果的一致性、稳定性较差，精确的表型鉴定非常困难。

2)花期喷雾鉴定法。在小麦抽穗扬花期将赤霉菌孢子液喷雾接种，该法较 自然鉴定法略好，但同时也存在表型鉴定难以精确和个体间发病率差异较大的 问题。喷雾接种时小麦所处的发育时期、喷雾接种次数、孢子浓度以及温湿度 等因素都是影响迷雾鉴定可靠性的重要因素。如果孢子浓度过稀，造成发病极 不一致的情形，即便感病的品种，也会有发病率极轻甚至不发病，出现所谓的 假抗性品种或“假免疫”类型品种，因此该法适合育种材料的大规模初步筛选。

3)土表接种法。在抽穗扬花期在田块表面撒带赤霉菌的玉米粒、燕麦粒或 粉碎的秸秆，配合喷雾设施，进行接种鉴定。该法模拟自然侵染法，但较自然 侵染法略好，适合抗病材料的大规模初步筛选和鉴定，不宜做精确鉴定和遗传 分析。

4)组织叶片离体鉴定法。利用病菌侵染离体的叶片组织，根据病斑的大小 鉴定抗感。由于赤霉病主要发生在穗部而非叶片，因此该法有多大程度反应品 种本身的抗性(尤其是扩展抗性)，有待商榷。

5)单花滴注法。此方法是目前已经成熟并广泛应用于实践中的抗性鉴定 技术主要是花期单花滴注法，其主要特征为：于小麦始花期在选取小麦的中下 部小穗，滴注赤霉菌孢子液10uL于小穗上，孢子液浓度C≥1×105。每个株 系接种10-15穗。田间接种后，用塑料袋套住穗部，保湿3d后去除，温室接 种后，控温控湿条件下,弥雾保湿3d。接种后21天观察并统计小麦发病小穗数 和总小穗数，计算出发病率、病情指数等抗病性鉴定指标。但是该方法在田间 进行大量接种试验时，具有耗时、耗力、接种方法繁复、易受环境影响等缺点。

评价赤霉病抗性鉴定方法优劣的主要指标有：1)是否受环境因素的影响大； 2)发病率，小麦赤霉病菌是半腐生菌，只要接种方法得当，理论或期望发病普 遍率应该达到100％；3)评价结果的稳定性和一致性，。评价结果在环境间、重 复间以及同一基因型个体间应具有重复性；4)是否环境友好；5)接种方法的 易操作性、效率和成本。

以往田间小麦赤霉病的接种试验大多都采用技术较为成熟的单花滴注方法 进行试验，由于田间赤霉病接种量大，此方法虽然准确，却步骤繁琐且耗时耗 力。

发明内容