[发明专利]一种小麦赤霉病轻简化接种方法

权利要求书

1.一种小麦赤霉病轻简化接种方法，其特征在于：包括下述步骤：

(1)配制PDA培养基；

(2)配置小麦赤霉病菌孢子悬浮液：采用绿豆培养基制作小麦赤霉病孢子悬浮液，获得光学显微镜10×10倍镜每个视野下20-30个孢子的孢子悬浮液；

(3)制备带菌牙签：将长度一致的牙签进行灭菌后，在无菌条件下，用牙签蘸取步骤(2)中配置好的小麦赤霉病菌孢子悬浮液后转入步骤(1)中配置的PDA培养基上，在20℃-30℃恒温培养箱中培养4.5d-5.5d；

(4)赤霉病菌的接种与套袋：在小麦有40％-60％麦穗杨花时，选取长势良好的同一品种的小麦植株标记挂牌，以步骤(3)中制备的带菌牙签进行牙签接种、套袋，牙签接种至少设10个重复；

(5)观察、记录与统计：在接种后第21天时，调查统计标记小麦穗的总小穗数、发病小穗数，并计算出病小穗率。

2.根据权利要求1所述的小麦赤霉病轻简化接种方法，其特征在于：所述步骤(1)中的PDA培养基的制备方法为：称取马铃薯，将其去皮后切成小块，然后加蒸馏水进行水煮，待马铃薯煮软后，采用6层纱布过滤；然后加入葡萄糖和琼脂粉，所述马铃薯、葡萄糖和琼脂粉之间的质量比为：18-22：2：1；化开后加蒸馏水定容，在温度为115℃-125℃进行湿热灭菌25min-35min。

3.根据权利要求2所述的小麦赤霉病轻简化接种方法，其特征在于：所述马铃薯、葡萄糖和琼脂粉之间的质量比为：20：2：1。

4.根据权利要求1-3中任意一项所述的小麦赤霉病轻简化接种方法，其特征在于：所述步骤(2)中，配置小麦赤霉病菌孢子悬浮液包括下述步骤：

①制备绿豆培养基：将绿豆加入蒸馏水煮28min-35min后定容，绿豆和定容体积之间的质量(g)：体积比(L)为30：1，过滤后分装至锥形瓶中，进行灭菌；

②在无菌条件下，接入小麦赤霉病菌菌饼，在温度为25℃-30℃、100r/min-200r/min的摇床中培养2.5d-3.5d，然后用纱布过滤菌丝，获得高浓度小麦赤霉病菌孢子悬浮液；

③在无菌条件中用显微镜观察步骤②中高浓度小麦赤霉病菌孢子悬浮液，并通过不断稀释获得光学显微镜10×10倍镜每个视野下20-30个孢子的孢子悬浮液。

5.根据权利要求4所述的小麦赤霉病轻简化接种方法，其特征在于：所述步骤(3)中的牙签在蘸取步骤(2)中配置好的小麦赤霉病菌孢子悬浮液之前，需要将牙签截断为2cm长，在121℃温度下进行湿热灭菌30min。

6.根据权利要求5所述的小麦赤霉病轻简化接种方法，其特征在于：所述步骤(3)中，用牙签蘸取步骤(2)中配置好的小麦赤霉病菌孢子悬浮液后转入步骤(1)中配置的PDA培养基上后，是在25℃恒温培养箱中培养5d。

7.根据权利要求6所述的小麦赤霉病轻简化接种方法，其特征在于：所述步骤(4)中，是在小麦有50％麦穗杨花时，选取长势良好的同一品种的小麦植株标记挂牌。

8.根据权利要求7所述的小麦赤霉病轻简化接种方法，其特征在于：所述步骤(4)中，牙签接种方法设20个重复。

9.根据权利要求8所述的小麦赤霉病轻简化接种方法，其特征在于：所述步骤(4)中，牙签接种方法接种套袋是采用宽16cm×长20cm的透明食品袋。