[发明专利]一种生物发酵生产乙基羟化物的方法

权利要求书

1.一种生物发酵生产乙基羟化物的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1：将面包酵母菌接入试管斜面培养基中，并置于温度26-28℃的恒温条件下培养时间48h，所述试管斜面培养基由麦芽汁40ml：琼脂1g组成，pH自然；

S2：将S1步骤中培养好的酵母菌接入茄瓶斜面培养基中，并置于温度26-28℃的恒温条件下培养时间48h，所述茄瓶斜面培养基由水1000g、葡萄糖30g、玉米浆20g、琼脂30g组成，pH自然；

S3：将S2步骤中培养好的酵母菌接入种子培养基中，并置于温度26～28℃条件下培养10～12h至种子培养基中的吸光度大于1.0×10，得到种子液；所述种子培养基由水200g、葡萄糖10g、玉米浆5g、泡敌0.2g组成，调节pH至4.6；

S4：将S3步骤中种子液接入发酵罐培养基中并置于温度28℃、以5L/min的速率通入空气，空气压力0.05mpa条件下搅拌，搅拌速度为120r/min，培养10～12h至发酵罐培养基中的吸光度大于1.2×10，得到发酵培养液；所述种子液与发酵罐培养基按各自所占发酵罐体积的2-10％：40-70％进行混合，所述发酵罐培养基由葡萄糖240g、玉米浆150g、水6000g、泡敌1.2g组成，调节pH至4.6；

S5：将S4步骤中的发酵培养液调节pH至6.4～6.6，控制物料温度28～32℃，加入乙基缩合物乙醇溶液，得到发酵液，发酵液在温度为28～32℃条件下通入压缩空气发酵72h，得到乙基羟化物；所述乙基缩合物乙醇溶液是由50g乙基缩合物加热溶于300mL体积浓度比为95％乙醇溶液中制得；

所述S5步骤中乙基缩合物的化学结构式为：

所述乙基羟化物的化学结构式为：

2.根据权利要求1所述的生物发酵生产乙基羟化物的方法，其特征在于，所述S1步骤中的试管斜面培养基的制备方法为：将麦芽汁、琼脂混合后加热溶解，再分装于试管中，后塞上棉花塞子，消毒20分钟，后搁成斜面备用。

3.根据权利要求1所述的生物发酵生产乙基羟化物的方法，其特征在于，所述S2步骤中的茄瓶斜面培养的制备方法为：将水、葡萄糖、玉米浆、琼脂混合后分装于茄瓶中，塞上棉塞，消毒20分钟，后搁成斜面备用。

4.根据权利要求2或3所述的生物发酵生产乙基羟化物的方法，其特征在于，所述S1、S2步骤中培养基的消毒温度均为121℃。

5.根据权利要求1所述的生物发酵生产乙基羟化物的方法，其特征在于，所述S3步骤中酵母菌接入前对种子培养基进行高温消毒；所述S4步骤中种子液接入前对发酵罐培养基进行高温消毒。

6.根据权利要求1所述的生物发酵生产乙基羟化物的方法，其特征在于，所述S5步骤中乙基缩合物溶于95％乙醇溶液时的加热温度为45～50℃。

7.根据权利要求1所述的生物发酵生产乙基羟化物的方法，其特征在于，所述S3和S4步骤中的培养基均通过氢氧化钠溶液调节pH。