[发明专利]基于液相芯片法的NRAS突变检测试剂盒和延伸引物

权利要求书

1.一种NRAS基因突变检测液相芯片试剂盒，其特征是，包括有：

(A).针对NRAS基因的2号外显子上的12号密码子、13号密码子，3号外显子上的第61位密码子、4号外显子上的146号密码子中的18个突变基因类型及野生基因型分别设计ASPE延伸引物，每种ASPE延伸引物由5’端的tag序列和3’端针对突变位点的特异性引物序列组成，突变基因类型的所述特异性引物序列包括：针对G34A位点的SEQ ID NO.22，针对G34T位点的SEQ ID NO.23，针对G34C位点的SEQ ID NO.24，针对G35A位点的SEQ ID NO.25，针对G35C位点的SEQ ID NO.26，针对G35T位点的SEQ ID NO.27，针对G37C位点的SEQ ID NO.28，针对G37T位点的SEQ ID NO.29，针对G38A位点的SEQ ID NO.30，针对G38T位点的SEQ ID NO.31，针对G38C位点的SEQ ID NO.32，针对C181A位点的SEQ ID NO.33，针对A182C位点的SEQ IDNO.34，针对A182T位点的SEQ ID NO.35，针对A182G位点的SEQ ID NO.36，针对A183T位点的SEQ ID NO.37，针对G436A位点的SEQ ID NO.38，针对C437T位点的SEQ ID NO.39；

野生基因型的ASPE延伸引物包括：针对2号外显子的SEQ ID NO.40，针对3号外显子SEQID NO.41、针对4号外显子SEQ ID NO.73；

(B).有anti-tag序列包被的、具有不同颜色编码的磁珠，所述anti-tag序列与磁珠连接中间还设有间隔臂序列；所述anti-tag序列包括SEQ ID NO.42～SEQ ID NO.62，且所述anti-tag序列能相应地与(A)中所选的tag序列完全互补配对；

(C).用于扩增出需要检测的、具有相应突变位点的目标序列的扩增引物。

2.根据权利要求1所述的NRAS基因突变检测液相芯片试剂盒，其特征是，所述扩增引物为选自以下至少一对：针对2号外显子的SEQ ID NO.63和SEQ ID NO.64，针对3号外显子SEQID NO.65和SEQ ID NO.66、针对4号外显子SEQ ID NO.67和SEQ ID NO.68。