[发明专利]一种霸王离体培养的方法

说明书

本发明提供了一种霸王离体培养的方法，包括以下步骤：1)将霸王种子依次经过流动水冲洗、酒精浸泡消毒、HgCl₂溶液浸泡消毒和无菌水冲洗后获得消毒种子；2)将所述消毒种子接种于1/2MS固体培养基培养10～15天获得无菌苗；3)从所述无菌苗上获取带叶腋的茎段接种于丛生芽诱导培养基中培养15～20天获得丛生芽；4)将步骤3)获得的丛生芽接种于生根培养基中培养10～15天获得组培苗。本发明所述方法具有操作简单、遗传稳定性高且繁殖周期短的优点。

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种霸王离体培养的方法。

背景技术

霸王(Zygophyllum xanthoxylum)是一种广泛分布于我国西北干旱荒漠区的蒺藜科多浆旱生植物，具有超强的抗旱性，蕴藏着丰富的抗旱基因资源。霸王多生长于干旱的砂地、多石砾地及覆沙地上，是荒漠灌丛植被的主要优势种和建群种之一，其抗逆性强，生态可塑性大，霸王的嫩枝、嫩叶和花均被骆驼所喜食，具有较好的饲用价值和适口性。霸王草地是我国西北地区的主要放牧地，然而霸王草地在我国的分布地区多为生态脆弱地带，尤其因为长期过度放牧退化迅速，荒漠化日趋严重。现有的霸王群落多分布稀疏，且破坏严重，生物量低。

而现有的霸王繁殖多采用扦插或播种育苗的方法，存在育苗时间受季节影响大、成活率低、育苗周期长的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种霸王离体培养的方法，解决现有技术中霸王繁殖受季节影响、成活率低、育苗周期长的问题。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：一种霸王离体培养的方法，包括以下步骤：1)将霸王种子依次经过流动水冲洗、酒精浸泡消毒、HgCl₂溶液浸泡消毒和无菌水冲洗后获得消毒种子；2)将所述消毒种子接种于1/2MS固体培养基培养10～15天获得无菌苗；3)从所述无菌苗上获取带叶腋的茎段接种于丛生芽诱导培养基中培养15～20天获得丛生芽；4)将步骤3)获得的丛生芽接种于生根培养基中培养10～15天获得组培苗；所述步骤2)、3)和4)中培养的温度独立为24～26℃。

优选的，步骤1)所述酒精浸泡消毒的时间为6～14min。

优选的，步骤1)所述HgCl₂溶液的质量分数为0.07～0.12％。

优选的，所述HgCl₂溶液浸泡消毒的时间为8～12min。

优选的，步骤2)中所述的1/2MS固体培养基中包括蔗糖和琼脂；所述蔗糖在1/2MS固体培养基中的浓度为12～18g/L，所述琼脂在1/2MS固体培养基中的浓度为7～9g/L；所述1/2MS固体培养基的pH值为5.7～5.9。

优选的，步骤3)所述丛生芽诱导培养基为添加6-BA和IBA的MS培养基。

优选的，所述6-BA在丛生芽诱导培养基中的浓度为1.2～1.8mg/L；所述IBA在丛生芽诱导培养基中的浓度为0.3～0.7mg/L。

优选的，所述丛生芽诱导培养基中还包括蔗糖和琼脂；所述蔗糖在丛生芽诱导培养基中的浓度为25～35g/L，所述琼脂在丛生芽诱导培养基中的浓度为7～9g/L；所述丛生芽诱导培养基的pH值为5.7～5.9。

优选的，步骤4)中所述的生根培养基为1/2MS培养基。

优选的，所述生根培养基中还包括蔗糖和琼脂；所述蔗糖在生根培养基中的浓度为25～35g/L，所述琼脂在生根培养基中的浓度为7～9g/L；所述生根培养基的pH值为5.7～5.9。

本发明的有益效果：本发明所述的霸王离体培养的方法，从无菌苗上采集外植体；通过丛生芽诱导途径获得再生植株，丛生芽诱导率为96％以上，生根诱导率为100％，具有操作简单、遗传稳定性高且繁殖周期短的优点。