[发明专利]一种霸王离体培养的方法

权利要求书

1.一种霸王离体培养的方法，包括以下步骤：

1)将霸王种子依次经过流动水冲洗、酒精浸泡消毒、HgCl₂溶液浸泡消毒和无菌水冲洗后获得消毒种子；

2)将所述消毒种子接种于1/2MS固体培养基培养10～15天获得无菌苗；

3)从所述无菌苗上获取带叶腋的茎段，将所述茎段接种于丛生芽诱导培养基中培养15～20天获得丛生芽；

4)将所述丛生芽接种于生根培养基中培养10～15天获得组培苗；所述步骤2)、3)和4)中培养的温度独立为24～26℃；

步骤3)所述丛生芽诱导培养基为添加6-BA和IBA的MS培养基；所述6-BA在丛生芽诱导培养基中的浓度为1.2～1.8mg/L；所述IBA在丛生芽诱导培养基中的浓度为0.3～0.7mg/L；

步骤4)中所述的生根培养基为1/2MS培养基。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)所述酒精浸泡消毒的时间为6～14min。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)所述HgCl₂溶液的质量分数为0.07～0.12％。

4.根据权利要求1或3所述的方法，其特征在于，所述HgCl₂溶液浸泡消毒的时间为8～12min。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述的1/2MS固体培养基中还包括蔗糖和琼脂；所述蔗糖在1/2MS固体培养基中的浓度为12～18g/L，所述琼脂在1/2MS固体培养基中的浓度为7～9g/L；

所述1/2MS固体培养基的pH值为5.7～5.9。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述丛生芽诱导培养基中还包括蔗糖和琼脂；所述蔗糖在丛生芽诱导培养基中的浓度为25～35g/L，所述琼脂在丛生芽诱导培养基中的浓度为7～9g/L；

所述丛生芽诱导培养基的pH值为5.7～5.9。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述生根培养基中还包括蔗糖和琼脂；所述蔗糖在生根培养基中的浓度为25～35g/L，所述琼脂在生根培养基中的浓度为7～9g/L；

所述生根培养基的pH值为5.7～5.9。