[发明专利]对卡那霉素具有双重特异性识别的适配体-分子印迹荧光传感器及其制备方法和应用

说明书

本发明提供一种对卡那霉素具有双重特异性识别的适配体‑分子印迹荧光传感器的制备方法，包括以下步骤：首先，由模版分子卡那霉素、巯基修饰的卡那霉素适配体、甲基丙烯酸形成预聚合复合物；然后，由预聚合复合物、交联剂、丙烯胺修饰的CdSe量子点、引发剂形成适配体‑量子点复合物；最后，将适配体‑量子点复合物中模版分子卡那霉素洗脱，得到对卡那霉素具有双重特异性识别的适配体‑分子印迹荧光传感器。本发明还提供一种有上述制备方法制备出的一种对卡那霉素具有双重特异性识别的适配体‑分子印迹荧光传感器，及其在检测样品中卡那霉素含量的应用。本发明的适配体‑分子印迹荧光传感器对卡那霉素具有双重特异性识别，对卡那霉素有很好的选择性。

技术领域

本发明属于分子印迹制备领域，尤其涉及一种对卡那霉素具有双重特异性识别的适配体-分子印迹荧光传感器及其制备方法和应用。

背景技术

卡那霉素是一种氨基抗生素，在治疗和预防微生物感染中发挥重要作用，但过量使用会导致过敏反应、肾毒性和听力丧失等副作用。另外，环境水和食品中残留的卡那霉素也会造成水体和食品污染，进而危及人类健康。目前卡那霉素的检测方法大部分需要昂贵的仪器和复杂的操作，耗时耗力。因此，寻找一种简单、快速和选择性检测卡那霉素的方法非常有必要。

分子印迹聚合物作为一种识别元件，近年来获得了持续的关注，并广泛应用于纯化分离、化学/生物传感和药物递送等领域。由于其在空间和大小方面为模板分子量身定做了互补的结合位点，分子印迹聚合物能够高特异性和选择性的识别模板分子。相比于传统的识别元件，分子印迹聚合物制备成本低、物理稳定性好、可以多次循环使用。

适配体是一种短的单链DNA或RNA分子，从随机序列核酸组合文库中通过指数式富集配体系统进化技术筛选得到。适配体有许多优点如无毒、化学稳定性好、价格便宜、容易被修饰、序列设计灵活多变、无免疫原性及可以高亲和性和特异性得结合几乎任何目标分子如小分子、蛋白甚至微生物和细胞。因为这些优点使适配体成为一种非常具有吸引力的生物分子识别元件，已被广泛关注。

考虑到适配体和分子印迹各自独特的优点，将适配体和分子印迹结合起来的研究近年来陆续有所报道。随后，研究者们不断进行新的尝试和探索，相继报道出基于石英晶体微天平的微量重量分析法、电化学检测策略、基于上转换纳米粒子的分子印迹聚合物探针、基于电化学发光能量转移的识别系统及基于金纳米粒子修饰聚合物的信号放大方法。然而，基于半导体量子点的适配体-分子印迹荧光传感目前尚未报道过。

因此，开发一种以半导体量子点作为支撑，巯基修饰的适配体和功能单体，结合巯基-双键点击反应，制备出的一种对卡那霉素具有双重特异性识别的适配体-分子印迹荧光传感器，用来快速、灵敏和专一性的检测样品中的卡那霉素。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对上述现有技术所存在的不足，提供一种对卡那霉素具有双重特异性识别的适配体-分子印迹荧光传感器的制备方法，其步骤简单；所制备出的适配体-分子印迹荧光传感器能快速、灵敏和专一性的检测样品中的卡那霉素。

为了实现上述目的，本发明采用以下的技术方案：

一种对卡那霉素具有双重特异性识别的适配体-分子印迹荧光传感器的制备方法，包括以下步骤，首先，由模版分子卡那霉素、巯基修饰的卡那霉素适配体和甲基丙烯酸形成预聚合复合物；然后，由预聚合复合物、交联剂、丙烯胺修饰的CdSe量子点和引发剂形成适配体-量子点复合物；最后，将适配体-量子点复合物中模版分子卡那霉素洗脱，得到对卡那霉素具有双重特异性识别的适配体-分子印迹荧光传感器。

优选的，一种对卡那霉素具有双重特异性识别的适配体-分子印迹荧光传感器的制备方法包括以下步骤：

1)制备预聚合复合物

将模版分子卡那霉素、巯基修饰的卡那霉素适配体、甲基丙烯酸形成预聚合复合物溶于pH值为7的缓冲液中，混合均匀，在温度为37℃的条件下，反应2小时，制得预聚合复合物；