[发明专利]一种用于流感病毒的有限复制型黏膜免疫疫苗

说明书

本发明公开了一种用于流感病毒的有限复制型黏膜免疫疫苗。本发明首先保护一种突变蛋白，是将流感病毒的NS1蛋白进行如下两个氨基酸残基的突变得到的：第38位氨基酸残基由精氨酸突变为丙氨酸，第41位氨基酸残基由赖氨酸突变为丙氨酸。本发明还保护一种重组病毒，是将流感病毒基因组中编码NS1蛋白的两个氨基酸残基的密码子进行如下突变得到的重组病毒：自N末端第38位氨基酸残基的密码子由精氨酸密码子突变为丙氨酸密码子，自N末端第41位氨基酸残基的密码子由赖氨酸密码子突变为丙氨酸密码子。本发明还保护以上任一所述重组病毒在制备流感病毒疫苗中的应用。本发明对于流感病毒的防治具有重大应用价值。

技术领域

本发明涉及一种用于流感病毒的有限复制型黏膜免疫疫苗。

背景技术

流行性感冒病毒，是正粘病毒科(Orthomyxoviridae)流行性感冒病毒(Influenzavirus)属的代表种，简称流感病毒，包括人流感病毒和动物流感病毒。人流感病毒分为甲(A)、乙(B)、丙(C)三型，是流行性感冒(流感)的病原体。甲型流感病毒抗原性易发生变异，多次引起世界性大流行，例如1918～1919年的大流行中，全世界至少有2000万～4000万人死于流感。乙型流感病毒对人类致病性较低。丙型流感病毒只引起人类不明显的或轻微的上呼吸道感染，很少造成流行。甲型流感病毒于1933年分离成功，乙型流感病毒于1940年获得，丙型流感病毒直到1949年才成功分离。

甲型流感病毒的RNA由8个节段组成，第1、2、3个节段编码的是RNA多聚集酶，第4个节段负责编码血凝素；第5个节段负责编码核蛋白，第6个节段编码的是神经氨酸酶；第7个节段编码基质蛋白，第8个节段编码的是一种未知功能的能起到拼接RNA功能的非结构蛋白。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于流感病毒的有限复制型黏膜免疫疫苗。

本发明首先保护一种突变蛋白，命名为NS1R38A/K41A蛋白，是将流感病毒的NS1蛋白进行如下两个氨基酸残基的突变得到的：第38位氨基酸残基由精氨酸突变为丙氨酸，第41位氨基酸残基由赖氨酸突变为丙氨酸。

编码所述突变蛋白的基因(命名为NS1R38A/K41A基因)也属于本发明的保护范围。

NS1R38A/K41A基因具体可为将编码NS1蛋白的基因进行如下两组突变得到的：第112-114位核苷酸由“cga”突变为“GCA”，第121-123位核苷酸由“aag”突变为“GCA”。

编码NS1蛋白的基因具体如序列表的序列1所示。

含有NS1R38A/K41A基因的质粒也属于本发明的保护范围。所述质粒具体可为质粒pHH21-NS1R38A/K41A。质粒pHH21-NS1R38A/K41A为将NS1R38A/K41A基因插入载体pHH21的多克隆位点(例如BsmBI酶切位点)得到的重组质粒。

本发明还保护一种重组病毒，是将流感病毒基因组中编码NS1蛋白的两个氨基酸残基的密码子进行如下突变得到的重组病毒：自N末端第38位氨基酸残基的密码子由精氨酸密码子突变为丙氨酸密码子，自N末端第41位氨基酸残基的密码子由赖氨酸密码子突变为丙氨酸密码子。

所述重组病毒具体可为：是将流感病毒基因组中编码NS1蛋白的两个氨基酸残基的密码子进行如下突变得到的重组病毒：自N末端第38位氨基酸残基的密码子由精氨酸密码子“cga”突变为丙氨酸密码子“GCA”，自N末端第41位氨基酸残基的密码子由赖氨酸密码子“aag”突变为丙氨酸密码子“GCA”。

所述重组病毒具体可为：是将流感病毒基因组中序列表的序列1所示的编码NS1蛋白的基因进行如下两组突变得到的：第112-114位核苷酸由“cga”突变为“GCA”，第121-123位核苷酸由“aag”突变为“GCA”。

以上任一所述NS1蛋白为如下(a)或(b)：