[发明专利]一种体外筛选细胞自噬调节剂的方法有效
申请号: | 201711264034.1 | 申请日: | 2017-12-05 |
公开(公告)号: | CN107976545B | 公开(公告)日: | 2020-07-28 |
发明(设计)人: | 魏砚明 | 申请(专利权)人: | 山西中医药大学 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68 |
代理公司: | 太原华弈知识产权代理事务所 14108 | 代理人: | 李毅 |
地址: | 030619 山西*** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 体外 筛选 细胞 调节剂 方法 | ||
1.一种体外筛选细胞自噬调节剂的方法,是采用稳定表达HA-SOD1 A4V突变体的HEK293细胞建立用于筛选自噬调节剂的体外评价模型,以待检测的自噬调节因子作为干预因素处理所述体外评价模型,再使用含有Triton X-100的细胞裂解液裂解所述处理后体外评价模型,分离出细胞裂解液中的Triton X-100不溶部分,根据Triton X-100不溶部分中HA-SOD1 A4V突变体的表达变化,判定所述自噬调节因子对细胞自噬的调节作用。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征是所述细胞裂解液中含有1% Triton X-100。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征是抑制Triton X-100不溶部分中HA-SOD1 A4V突变体堆积的自噬调节因子为自噬诱导剂。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征是促进Triton X-100不溶部分中HA-SOD1 A4V突变体堆积的自噬调节因子为自噬抑制剂。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征是采用离心分离方式进行Triton X-100不溶部分的分离。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征是采用Western杂交检测Triton X-100不溶部分中HA-SOD1 A4V突变体的表达变化。
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