[发明专利]一种与凡纳滨对虾生长性状相关的EST-STR标记Lv-F36a及其扩增引物和应用有效
| 申请号： | 201711250042.0 | 申请日： | 2017-12-01 |
| 公开（公告）号： | CN108034729B | 公开（公告）日： | 2021-03-05 |
| 发明（设计）人： | 任春华;江晓;吴小芬;黄文;陈廷;胡超群 | 申请（专利权）人： | 中国科学院南海海洋研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 刘明星;胡素丽 |
| 地址： | 511458 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 凡纳滨 对虾 生长 性状 相关 est str 标记 lv f36a 及其 扩增 引物 应用 | ||
1.一种与凡纳滨对虾生长性状相关的EST-STR标记Lv-F36a的扩增引物，其特征在于，包括以下引物：
F：5’-GCCTCGGTAACATTGTGAAGAG-3’；
R：5’-ACAGCAACCAGGGTATTCAGG-3’。
2.根据权利要求1所述的扩增引物，其特征在于，所述的扩增引物的正向引物的5’端标记有荧光基团。
3.根据权利要求2所述的扩增引物，其特征在于，所述的荧光基团为TAMRA、HEX或FAM。
4.权利要求1所述的扩增引物在凡纳滨对虾分子标记辅助育种中的应用。
5.一种凡纳滨对虾生长快速优良品种的选育方法，其特征在于，包括以下步骤：提取待测凡纳滨对虾基因组DNA作为模板，用权利要求3所述的扩增引物进行PCR扩增，采用测序仪对PCR扩增产物进行分型，并利用软件读取等位基因片段的长度，选择扩增片段长度包含424bp、434bp、438bp或440bp的个体进行留种和建立家系，以选育凡纳滨对虾生长快速优良品种。
6.根据权利要求5所述的选育方法，其特征在于，所述的提取待测凡纳滨对虾基因组DNA具体为：取待测凡纳滨对虾的1个腹肢，以腹肢作为材料提取基因组DNA。
7.根据权利要求5所述的选育方法，其特征在于，所述的PCR扩增，其反应体系为25μL，包括：不含Mg2+的10×PCR buffer 2.5μL、25mM MgCl2 2.0μL，10mM dNTP 0.5μL、5U/μL高保真PCR酶0.2μL、10μM正向引物0.5μL、10μM反向引物0.5μL、DNA模板12.5ng，其余由无菌双蒸水补足至25μL。
8.根据权利要求5～7任一项所述的选育方法，其特征在于，所述的PCR扩增，其反应程序为：95℃预变性5分钟；95℃变性30秒，60℃退火30秒，72℃延伸30秒，共35个循环；72℃再延伸6分钟。
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