[发明专利]一种利用松花粉粕制备抗氧化松花粉肽的方法

权利要求书

1.一种利用松花粉粕制备抗氧化松花粉肽的方法，其特征在于，步骤如下：

(1)将松花粉粕用粉碎机粉碎，按照1:(10-15)(w:v)的比例加入乙醇，在60℃水浴中搅拌提取1-3h，离心10-20min，收集沉淀在自然通风条件下静置18-24h，加水配制成4-8wt％的松花粉粕溶液；

(2)取步骤(1)的松花粉粕溶液用碱性溶液调节pH为11.5，在60℃水浴中搅拌提取1-3h，离心10-20min，收集上清液；上清液用酸性溶液调节pH为4.5-5.5，离心10-20min，收集沉淀，加水配制成2-4wt％的松花粉蛋白分散液，并调节pH为7.0-8.0，得到松花粉分离蛋白溶液；

(3)取步骤(2)的松花粉分离蛋白溶液通过碱性溶液调节pH为8.0-10.0，然后加入蛋白酶1000-5000U/g，在50-60℃水浴中水解1-6h，保持温度和pH恒定，当水解度达到7.8-24.5％时停止酶解，得到松花粉蛋白酶解液；

(4)取步骤(3)的松花粉蛋白酶解液于85-100℃水浴灭活蛋白酶5-15min，冷却至20-25℃后，离心10-20min，收集上清液，经超滤膜进行超滤，得到松花粉肽超滤液；

(5)将步骤(4)的松花粉肽超滤液进行减压蒸发浓缩和真空冷冻干燥，得到抗氧化松花粉肽产品；

其中，步骤(4)中所述的超滤膜截留分子量小于10000Da；

其中，步骤(3)中所述的蛋白酶为胰酶。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述的乙醇浓度为80wt％。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)(2)(4)中所述的离心转速为2000-4000r/min。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中所述的水解在震荡状态下进行。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的碱性溶液为2-5wt％氢氧化钠溶液；所述的酸性溶液为2-5wt％盐酸溶液。