[发明专利]一种三氯杀螨醇半抗原制备方法及其应用

权利要求书

1.一种三氯杀螨醇半抗原的制备方法，其特征在于：于单口瓶中倒入20ml DMF，加入3.7g三氯杀螨醇，加入碳酸钾2.76g，室温搅拌20min；加入琥珀酸酐1.2g，缓慢升温至60度，反应10h，降温，加入50ml水，移入分液漏斗，乙酸乙酯萃取；干燥，蒸干溶剂，柱层析纯化，得到3.8g目标物，收率82％，即得到三氯杀螨醇半抗原。

2.如权利要求1所述的一种三氯杀螨醇半抗原的制备方法，其特征在于所述三氯杀螨醇半抗原的分子结构式为：

3.如权利要求1所述的一种三氯杀螨醇半抗原的制备方法，其特征在于所述三氯杀螨醇半抗原能够制备免疫原，所述免疫原的制备方法如下：

(1)将半抗原2.35g溶于20ml DMF中，加入NHS 0.7g，DCC 1.3g，室温搅拌5h，加入50ml水，移入分液漏斗，乙酸乙酯萃取；干燥，蒸干溶剂，柱层析纯化，得到2.64g目标物A，收率93％；

(2)将133mg BSA溶于5ml 0.01M PBS，搅拌溶解；第(1)步的目标物A与BSA比例可在1∶1～60∶1的范围内调整，本申请选择在加入57mg目标物A(与BSA摩尔比为50∶1)，加入EDC盐酸盐10mg，室温搅拌2h；移入透析袋中透析48h。

4.如权利要求1所述的一种三氯杀螨醇半抗原的制备方法，其特征在于所述三氯杀螨醇半抗原能够制备包被原，所述包被原的制备方法如下：

(1)将半抗原2.35g溶于20ml DMF中，加入NHS 0.7g，DCC 1.3g，室温搅拌5h，加入50ml水，移入分液漏斗，乙酸乙酯萃取；干燥，蒸干溶剂，柱层析纯化，得到2.64g目标物A，收率93％；

(2)将86mg OVA溶于5ml 0.01M PBS，搅拌溶解；第(1)步的目标物A与OVA比例可在1∶1～40∶1的范围内调整，本申请选择在加入45.6mg目标物A(与OVA摩尔比为40∶1)，加入EDC盐酸盐10mg，室温搅拌2h；移入透析袋中透析48h。

5.如权利要求1所述的一种三氯杀螨醇半抗原的制备方法，其特征在于所述三氯杀螨醇半抗原能够用于制备一种检测三氯杀螨醇的时间分辨荧光试纸条，包括样品吸收垫、反应膜以及吸水垫，其特征在于所述反应膜位于中间，样品吸收垫与吸水垫分别搭接于反应膜左右两端；所述样品吸收垫上设有加样区和微球区，微球区上载有三氯杀螨醇时间时间分辨荧光微球；所述反应膜上设有检测线(T线)和质控线(C线)，T线接上包被三氯杀螨醇抗原(包被原)，C线包被抗兔抗体。

6.如权利要求1所述的一种三氯杀螨醇半抗原的制备方法，其特征在于所述三氯杀螨醇半抗原能够用于制备一种检测三氯杀螨醇的胶体金免疫层析试纸条，所述试纸条包括样品吸收垫、胶体金垫、反应膜和吸水垫，所述反应膜上有检测区和质控区，所述检测区包被三氯杀螨醇抗原(包被原)。

7.一种检测茶叶、白菜、大米、植物油、鱼肉、虾肉等样品中三氯杀螨醇残留的方法，其包括步骤：

1)样本前处理；

2)用权利要求5-6任一项所述的试纸条进行检测；

3)分析检测结果。