[发明专利]一种Fascaplysin的衍生物及制备方法与用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种化合物及其制备和这种化合物的用途，确切讲本发明涉及一种Fascaplysin的衍生物，及其制备和在药物中的应用。

背景技术

Fascaplysin是一种红色色素，在1988年首先由Roll et al.从斐济海洋海绵Fascaplysinopsis sp中分离出，也是第一个天然存的五环环系12H-吡啶并[1,2-a：3,4-b]二吲哚成员。Fascaplysin表现出广泛的生物活性，包括抗细菌，抗真菌，抗病毒，HIV-1-RT，p56酪氨酸激酶，抗疟疾，对许多癌细胞系也有效，以及CDK4抑制作用。Fascaplysin可以抑制几种微生物的生长，包括金黄色葡萄球菌，大肠杆菌，白色念珠菌和酿酒酵母。fascaplysin显示出对小鼠白血病细胞L-1210的增殖的抑制，ED50值为0.2μM/mL，并且在鼠肿瘤细胞毒性测定中显示出选择性。Fascaplysin表现出对人宫颈癌HeLa细胞的抗增殖作用，通过外源性死亡途径和线粒体途径诱导凋亡，但不能在G1期进行细胞周期阻滞。Fascaplysin通过血管内皮生长因子(VEGF)阻断和对人脐静脉内皮细胞进行细胞周期阻滞和凋亡，使其显示出抗血管生成活性。最近Yan等人报道了fascaplysin抑制S180细胞植入肿瘤的生长，可能通过凋亡，抗血管生成或细胞周期停滞机制。Fascaplysin同样显示出特异性CDK4抑制活性，其IC50值为0.35μM，并且还阻断癌细胞在细胞周期的G0/G1期的生长。然而，同样可以观察到fascaplysin对其他CDKs的活性较差，CDK1/Cyclin B的IC50>100μM，CDK2/Cyclin A和CDK-2/Cyclin E的IC50>50μM，CDK5/p35的IC50值为20μM。有趣的是，CDK4/Cyclin D2和CDK4/Cyclin D3在>100μM浓度时不被抑制，而CDK6/Cyclin D2被抑制，其IC50为35μM。这可以反映细胞周期蛋白与其CDKs以不同的方式结合。Fasacaplysin由于其平面五环结构，还显示出DNA插入活性。研究发现fascaplysin的结合模式和亲和常数与其他典型的DNA嵌入剂的结合模式和亲和常数相当。这种嵌合使fascaplysin具有较高细胞毒性，毒副作用大，严重限制了其临床应用。

发明内容

本发明研究了大量国内外文献的基础上，以具有特异选择性的CDK4小分子抑制活性的天然产物Fascaplysin(平面五环季铵盐)为先导化合物，利用计算机辅助药物设计软件设计了一系列Fascaplysin的衍生物，以降低其DNA嵌入能力，以及保留CDK4抑制剂的药效作用，药理实验证明，本发明的化合物具有较好抗肿瘤活性。

本发明的化合物通式如式(Ⅰ)示：

其中，取代基R₁为氯、甲基、甲氧基、硝基。

本发明所述式(Ⅰ)示化合物制备方法参见式(Ⅱ)，即：在反应容器中

依次加入1,2二氯乙烷(20ml)、三光气(2mmol)，冰浴搅拌下将相应的胺(4mmol)、三乙胺(16mmol)溶于1,2二氯乙烷中逐滴加入圆底烧瓶中(t＝30min)，完毕后85℃回流搅拌4h，反应液通过减压蒸馏就可以得到中间体异氰酸酯。中间体加入1,2二氯乙烷(20ml)，搅拌下分批加入色胺(4mmol)，随后加入三乙胺(5mmol)，室温搅拌24h，点板监测，待产物点颜色不再加深，副产物有淡点出现，反应即停止，减压蒸馏，依次用饱和氯化钠水溶液，5％碳酸氢钠水溶液洗涤，无水硫酸镁干燥，色谱柱(石油醚:二氯甲烷：乙酸乙酯＝4:2:1)提纯得到目标化合物。

本发明式(Ⅰ)示化合物可在制备预防或治疗与细胞周期蛋白依赖性激酶CDK4抑制剂有关的疾病的药物中的应用。

本发明式(Ⅰ)示化合物在于可在制备预防或治疗下列疾病的药物中的应用,所述疾病是:黑色素瘤、肝癌、胃癌、非小细胞肺癌、前列腺癌、甲状腺癌、结肠直肠癌、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、食管癌、胃肠道癌。

上述化合物包括式(Ⅰ)示化合物及其在药学上可接受的盐，例如与下列酸形成的酸加成盐：盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、萘磺酸、对甲苯磺酸、乳酸、丙酮酸、柠檬酸、酒石酸、乙酸、马来酸、苯磺酸、琥珀酸、富马酸、水杨酸、苯基乙酸或杏仁酸；此外还包括无机碱的酸式盐，如：含有碱性金属阳离子、碱土金属阳离子、铵阳离子盐。