[发明专利]一种提高麦汁过滤性能的α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶

说明书

本发明公开了一种提高麦汁过滤性能的α‑L‑阿拉伯呋喃糖苷酶，属于生物工程技术领域。本发明对α‑L‑阿拉伯呋喃糖苷酶的基因进行了修饰，去除了内含子，信号肽和终止密码子序列，其修饰后的α‑L‑阿拉伯呋喃糖苷酶的基因序列如SEQ ID NO.4所示，对应的氨基酸的序列如SEQ ID NO.2所示。将修饰后的α‑L‑阿拉伯呋喃糖苷酶基因序列与表达载体pPIZαA连接，构建重组表达载体pPIZαA‑QAnabfA并在毕赤酵母X33中表达获得重组α‑L‑阿拉伯呋喃糖苷酶。将重组α‑L‑阿拉伯呋喃糖苷酶应用到麦汁的制造中提高麦汁的过滤速度。

技术领域

本发明涉及一种提高麦汁过滤性能的α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶，属于生物工程技术领域。

背景技术

阿拉伯木聚糖(arabinoxylans，AX)是半纤维素的主要成分，其基本结构是以β-(1→4) -D吡喃木糖残基为线形骨架，同时在C(O)-3，(O)-2或C(O)-2，3键联上α-L-阿拉伯呋喃糖残基为侧链取代基。AX的降解需要多种酶的协同作用，如内切β-木聚糖酶、外切β-木聚糖酶、β-木糖苷酶和α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶等。

在大麦麦芽中AX的含量为3.1％～4.0％，水溶性阿拉伯木聚糖(water-extractable arabinoxylans,简称WEAX)的含量为0.49％～0.69％。AX在麦汁的制造过程中会产生很多问题，尤其是多聚阿拉伯木聚糖(polymeric arabinoxylans,简称PAX)，比如降低麦汁的过滤速度，增加麦汁的粘度等。但在AX的降解过程中，L-阿拉伯呋喃糖残基的存在阻碍了其它水解酶与AX的有效结合，进而降低了水解酶对AX的降解效率，影响麦汁的过滤性能。α-L- 阿拉伯呋喃糖苷酶苷酶(α-L-Arabinofuranosidase,简称AnabfA)存在于糖基水解酶的第3、 43、51、54、62和127家族。它可特异性地从L-阿拉伯糖多糖或寡糖残基的非还原末端α-L-1,2-，α-L-1,3-和α-L-1,5-位点水解生成一个阿拉伯糖。AnabfA已经在一些细菌，真菌和植物中获得，但由于酶活较低，不具备工业化应用价值。