[发明专利]改进液体培养基的制备方法

权利要求书

1.改进液体培养基的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，称取以下原料：

溶剂为注射用水的相对用量为1000ml：

含氮源为：胰酪胨：15～80g，胰胨：20～70g，精选大豆胨：10～80g，大豆胨：10～80g，酸水解酪蛋白：10～70g，酵母提取物：15～40g，酵母浸粉：5～40g中的任意三种组合物；

碳源为：葡萄糖：5.0～50g；

盐类为：K₂HPO₄：0～12.0g，KCl：0～7.0g，Na₂HCO₃：0～5.0g，NaCl：3.0～10.0g，MgSO₄·7H₂O：0.4～5.0g，CaCl₂：0～0.14g；

微量元素为：L-半胱氨酸盐酸盐：0.12～1.80g，烟酸：0.5～1.2mg，腺嘌呤：5.5～10.5mg，FeSO₄：2.5～6.5mg；

步骤2，采用注射用水对上述原料依次进行溶解；

步骤3，将采用注射用水溶解后的混合溶液进行定容到所需体积，并调节pH值；

步骤4，除菌后获得液体培养基。

2.根据权利要求1所述的改进液体培养基的制备方法，其特征在于，所述步骤2中，将所述原料均加入同一容器内，然后向盛由原料混合物的容器中在不断搅拌条件下加入注射用水；在添加完注射用水后，进行加热溶解。

3.根据权利要求2所述的改进液体培养基的制备方法，其特征在于，所述加热溶解步骤为：先以1℃/min的升温速率由25℃升温至30℃，在30℃温度条件下保持10min，然后以1℃/min的升温速率由38℃升温至35℃，在38℃温度条件下保持5min。

4.根据权利要求1所述的改进液体培养基的制备方法，其特征在于，所述步骤3中，采用质量浓度为10％的NaOH溶液调节pH值至7.0～7.8。

5.根据权利要求1所述的改进液体培养基的制备方法，其特征在于，所述步骤4中，在无菌操作条件下经0.1μm的过滤减压过滤除菌。

6.根据权利要求1所述的改进液体培养基的制备方法，其特征在于，所述步骤1中，称取各原料的组成为，溶剂为水的相对用量为1000ml：

含氮源为：胰酪胨：55g，胰胨：50g，精选大豆胨：50g，大豆胨：45g，酸水解酪蛋白：45g，酵母提取物：28g，酵母浸粉：25g中的任意三种组合物；

碳源为：葡萄糖：25g；

盐类为：K₂HPO₄：6.5g，KCl：4.5g，Na₂HCO₃：2.5g，NaCl：6.0g，MgSO₄·7H₂O：2.6g，CaCl₂：0.09g；

微量元素为：L-半胱氨酸盐酸盐：1.12g，烟酸：0.9mg，腺嘌呤：8.5mg，FeSO₄：4.0mg。