[发明专利]一种铁皮石斛原球茎大量分化及生根方法

权利要求书

1.一种铁皮石斛原球茎大量分化及生根方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)无菌外植体的获得：用清洁粉浸泡铁皮石斛蒴果3min，然后捞出用自来水冲洗干净，在无菌条件下用70vt％酒精表面消毒1.5min，无菌水清洗1分钟，再用2wt％的次氯酸钠溶液浸泡10-15min，最后用无菌水清洗4-5次，每次清洗1min，冲洗结束后用灭菌滤纸吸去铁皮石斛蒴果表面的水分，然后接种在增殖培养基中培养30天，得到原球茎；培养条件为培养温度22-26℃；光照时间10-12h/d，光照强度2000lx；

(2)原球茎大量分化：选取状态良好的原球茎接入分化培养基进行原球茎分化培养得到幼苗；

(3)幼苗生根培养：将幼苗接入壮苗生根培养基中进行芽生根培养。

2.如权利要求1所述的铁皮石斛原球茎大量分化及生根方法，其特征在于，所述的增殖培养基配方如下：1/2MS培养基、1-萘乙酸0.2mg/L、6-苄氨基腺嘌呤0.5mg/L、水解乳蛋白0.5g/L-1.0g/L、蔗糖30g/L-40g/L、琼脂5.5g/L-6.5g/L、土豆汁30g/L-70g/L、腺苷酸环化酶1.0g/L-2.0g/L，pH为5.8-6.5。

3.如权利要求1所述的铁皮石斛原球茎大量分化及生根方法，其特征在于，所述的增殖培养基配方如下：1/2MS培养基、1-萘乙酸0.2mg/L、6-苄氨基腺嘌呤0.5mg/L、水解乳蛋白0.5g/L、蔗糖30g/L、琼脂6.5g/L、土豆汁50g/L、腺苷酸环化酶1.5g/L，pH为5.8。

4.如权利要求1所述的铁皮石斛原球茎大量分化及生根方法，其特征在于，所述的分化培养基的配方如下：1/2MS培养基、1-萘乙酸0.5mg/L、6-苄氨基腺嘌呤0.9mg/L、水解乳蛋白0.8g/L、蔗糖30g/L、琼脂6.5g/L、土豆汁60g/L、腺苷酸环化酶2.0g/L，pH为5.8。

5.如权利要求1所述的铁皮石斛原球茎大量分化及生根方法，其特征在于，所述的壮苗生根培养基的配方如下：1/2MS培养基、1-萘乙酸1.0mg/L、蔗糖30g/L、琼脂6g/L、香蕉泥35g/L、腺苷酸环化酶1g/L，pH为5.8。